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'''两个染色体组的细胞'''
凡是由[[受精卵]]发育而来，且体细胞中含有两个[[染色体组]]的细胞，均称为[[二倍体]]。可用2n表示。人和几乎全部的[[高等动物]]，还有一半以上的[[高等植物]]都是二倍体。

*中文名:[[二倍体细胞]]

*外文名:diploid cell

*来    源:[[受精卵]]发育而来表示方法2n表示

==概念和来源==
二倍体细胞（diploid cell）

含有两个染色体组的细胞，通常以2n表示体[[细胞]]的染色体数目，用n表示性细胞的染色体数目。

二倍体细胞株来源于正常人胎儿组织，主要用于培养病毒制备疫苗等。

==细胞株的要求==
'''细胞株的要求'''

用于[[疫苗]]生产的人二倍体细胞株（以下简称细胞株）须按下列规定进行全面检定。新建立细胞株，应按《[[新生物制品审批办法]]》进行审批。

===具备的资料===

1.1　建立细胞株所用的[[胎儿]]的胎龄和性别，中止妊娠原因。

1.2　建立[[细胞株]]所用胎儿的父、母年龄、职业及健康状况，胎儿父、母系三代应无明显遗传缺陷和肿瘤疾病历史。在取胎儿组织时，应作出详细调查，报卫生部审批前，应进行一次重复调查。

1.3　原始组织种类，原代培养的数量与生长状况。

1.4　细胞培养史和生长特征，细胞寿命、世代数。

1.5　细胞生长液的成分。

'''细胞株的检定'''

2.1　染色体的鉴定和制片

细胞原系建株过程，每8～12世代*应作一次染色体检查，一株细胞整个生命期内连续培养过程中，至少应有4～5次染色体检查结果。

每次染色体检查，应从同一世代不同细胞培养瓶中取细胞混合再培养，制备染色体标本片。染色体标本应长期保存（直至褪色不能用为止），以备复查。

每次染色体检查，至少应随机取1000个分裂中期细胞，进行染色体数目、形态和结构检查，并作出有助于复查的记录，其中至少选择50个分裂中期细胞进行显微照相，作出核型分析。并应粗数500个分裂中期细胞，检查多倍体的发生率。

可以G分带或Q分带技术检查50个中期细胞染色体带型，应用照相图片作出带型分析。以显带技术检出的核型异常（假二倍体、倒位、易位等）发生率应用比现用上限更宽的基本数据进行评价，合格上限尚未定出。

2.2　外源因子检查

细胞株不应有细菌、霉菌、支原体和病毒等污染。每8～12世代细胞培养物，应进行下列检查。

2.2.1　细菌、霉菌、支原体检查

按《生物制品无菌试验规程》进行。

2.2.2　病毒检查

2.2.2.1　细胞直接观察及红细胞吸附试验

取混合瓶细胞样品，接种小瓶或小管，长成单层后更换维持液，观察2周，镜检细胞，应保持正常形态特征。培养7天，用0.2%～0.5%鸡和豚鼠混合红细胞悬液进行红细胞吸附试验，先置于4～8℃，后置于20～25℃，各30分钟，两次观察结果均应为阴性。

2.2.2.2　细胞培养检查

细胞培养的上清液混合样品，至少接种4种细胞（原代人肾或猴肾细胞、原代兔肾细胞、人源传代细胞和另一批人二倍体细胞）。接种的样品量应占维持液的20%以上，于培养5～7天和14天时，进行红细胞吸附试验（见2.2.2.1项）。培养7天的上清液在同种细胞培养上盲传一代，观察14天，应无细胞病变，红细胞吸附试验应为阴性（在该试验的细胞维持液中，允许加入少量该细胞培养用的牛血清，以利细胞维持和观察）。

2.2.2.3　动物试验检查

用乳鼠、成鼠、家兔、豚鼠和鸡胚各一组。每组动物或鸡胚接种受检细胞不应少于107。按表2所列要求进行试验和观察。如80%以上动物和鸡胚健存，此试验为通过。

2.2.2.4　其他检查

细胞株传代过程中，至少于2个不同世代水平进行包涵体、乙型肝炎表面抗原及电镜检查，结果均应为阴性。




==参考文献==
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