檢視心肌细胞的原始碼

'''心肌细胞'''又称心肌纤维，有横纹，受[[植物性神经]]支配，属于有横纹的不随意肌，具有兴奋收缩的能力。呈短圆柱形，有分支，其细胞核位于细胞中央，一般只有一个。各心肌纤维分支的末端可相互连接构成肌纤维网。广义的心肌细胞包括组成窦房结、[[房内束]]、房室交界部、房室束（即希斯束）和浦肯野纤维等的特殊分化了的心肌细胞，以及一般的心房肌和心室肌工作细胞。<ref>[https://zhidao.baidu.com/question/1394093322589685980.html?fr=bks0000&word=%E5%BF%83%E8%82%8C%E7%BB%86%E8%83%9E 心肌细胞所处的内环境]百度知道</ref>  
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== 分类 ==
根据它们的组织学特点、电生理特性以及功能上的区别，可以粗略地分为两大类型，两类心肌细胞分别实现一定的职能，互相配合，完成心脏的整体活动
== 结构特征 ==
1.心肌细胞为短柱状，一般只有一个细胞核，而[[骨骼肌纤维]]是多核细胞。心肌细胞之间有闰盘结构。该处细胞膜凹凸相嵌，并特殊分化形成桥粒，彼此紧密连接，但心肌细胞之间并无原生质的连续。心肌组织过去曾被误认为是合胞体，电子显微镜的研究发现心肌细胞间有明显的隔膜，从而得到纠正。心肌的闰盘有利于细胞间的兴奋传递。这一方面由于该处结构对电流的阻抗较低，兴奋波易于通过；另方面又因该处呈间隙连接，内有15～20埃的嗜水小管，可允许钙离子等离子通透转运。因此，正常的心房肌或心室肌细胞虽然彼此分开，但几乎同时兴奋而作同步收缩，大大提高了心肌收缩的效能，功能上体现了合胞体的特性，故常有“功能合胞体”之称。
2.心肌细胞的细胞核多位于细胞中部，形状似椭圆或似长方形，其长轴与肌原纤维的方向一致。肌原纤维绕核而行，核的两端富有肌浆，其中含有丰富的糖原颗粒和线粒体，以适应心肌持续性节律收缩活动的需要。从横断面来看，心肌细胞的直径比骨骼肌小，前者约为15微米，而后者则为100微米左右。从纵断面来看，心肌细胞的肌节长度也比骨骼肌的肌节为短。
3.在电子显微镜下观察，也可看到心肌细胞的肌原纤维、横小管、肌质网、线粒体、糖原、脂肪等超微结构。但是心肌细胞与骨骼肌有所不同；心肌细胞的肌原纤维粗细差别很大，介于0.2～2.3微米之间；同时，粗的肌原纤维与细的肌原纤维可相互移行，相邻者又彼此接近以致分界不清。心肌细胞的横小管位于Z线水平，多种哺乳动物均有纵轴向伸出，管径约0.2微米。而骨骼肌的横小管位于A－I带交界处，无纵轴向伸出，管径较大，约0.4微米。心肌细胞的肌质网丛状居中间，侧终池不多，与横小管不广泛相贴。
== 细胞培养 ==
鼠心肌细胞的培养和分离
目的
建立心肌细胞培养模型，用于心肌细胞体外实验。
方法
采用胰酶消化及新生大鼠心肌细胞与非心肌细胞如成纤维细胞、血细胞等的差时贴壁法分离提纯心肌细胞，建立心肌培养模型。
结果
心肌细胞培养最长成活时间达3天，心肌细胞受消化时间的影响有不同的形态表现。
结论
可以利用差时贴壁法分离新生鼠心肌细胞并在体外进行培养，胰酶消化以低浓度短时间为佳。
材料
1.心肌细胞的消化
取一只加盖烧杯，内放一块用乙醚饱和的纱布，把0~3日龄的大鼠幼鼠放进该烧杯中麻醉，用2%碘酒和75%酒精消毒胸腹皮肤，在无菌条件下开胸取出心脏，立即置于4ºCD-Hanks液(mmol/L：Nacl137,Kcl5.4,Na2HPO40.37,K2HPO40.44,NaHCO34.2)中剪取心室肌，洗净残血，剪成约1mm³大小的组织块，弃去D-Hanks液加入0.08%胰蛋白酶液10~15ml，于37°C静置5min，吸出上层悬液，并加入等量的含血清培养基。经终止消化后离心(1800r/min)弃上清液，加入含血清的培养液。吹散沉淀细胞，同条件下离心，用10%血清培养液制成细胞悬液，置于37°C含5%CO2培养箱中。
心肌细胞分离
根据心肌细胞和非心肌细胞贴壁时间的不同采用2小时差速贴壁，分别获得心肌成纤维细胞和心肌细胞。心肌细胞按1*106个细胞/ml种于50ml培养液中，培养的前2天在心肌细胞培养液中加入5-溴脱氧嘧啶核苷0.1mmol/l，以抑制非心肌细胞增殖，所有培养的心肌细胞均每2天换液一次。
1.3心肌细胞的无血清培养
当心肌细胞培养24小时后换无血清培养液（含DMEM培养液，胰岛素10g/ml,铁蛋白10g/ml，维生素C100g/L维生素B121.5&micro;mol/L）继续培养48小时,每隔8小时换液一次,尽量保持各添加成分浓度不变,最后收集细胞,进行测定。
2.实验结果
本次实验中新生大鼠心肌细胞培养最长存活时间为3天。实验采取低浓度，短时间胰蛋白酶消化的方法。消化时间不同，所得到的细胞有不同的形态变化:消化3~5分钟，高倍镜下观察心肌细胞大部分呈新月形，并可见细胞在培养液中呈头尾相连的过程，呈动态变化。而消化5~10分钟的心肌细胞卷曲呈圆形,密度低,活动能力差。细胞培养约8小时后向一处聚集，彼此钩连呈现高密度区，这可能与细胞之间形成连接有关。由于某种不明原因，多次培养过程中心肌细胞中都出现不明微生物，致使细胞在3天后基本死亡。
3.实验讨论
有很多文献报道新生大鼠心肌细胞的培养时间为10~12天，本次实验的培养时间为3天，与之比较成活时间较短,但本实验可以说明低浓度胰蛋白酶消化液(0.08%)比一般浓度(0.125%)的消化时间效果好，消化时间在3~5分钟内可减少细胞死亡率.实验过程中出现的细胞向一处聚集的现象和可见的连续的形态变化，可以说明体外培养心肌细胞重新连接成更大单位[[细胞团]]是可能的，它们可能通过形态的变化相互钩连，连接成网。
==参考文献==
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[[Category:800 語言、文學類]]