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'''米氏常数'''（Km）的含义是酶促反应达最大速度（Vm）一半时的底物(S)的浓度。它是酶的一个特征性物理量，其大小与酶的性质有关。它被广泛应用到[[生物化学]]、[[分子生物学]]、[[基因工程]]、[[生物制药]]、[[临床用药]]等领域的理论、实验和实践中。
[[File:米氏常数1.jpg|缩略图|米氏常数[https://ss0.bdstatic.com/70cFuHSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=4036526527,1575623179&fm=26&gp=0.jpg 原图链接][https://ss0.bdstatic.com/70cFuHSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=4036526527,1575623179&fm=26&gp=0.jpg 图片来源百度网]]]

'''中文名''':[[米氏常数]]

'''应    用''':[[酶促反应]]

'''数    值''':[[达到其最大速度一半时底物浓度]]

'''单    位''':[[mol/l]]

'''地    位''':[[重要的动力学参数]]

'''记    法''':[[Km]]

'''一、概述'''

在20世纪初期，就已经发现了酶被其底物所饱和的现象，而这种现象在非酶促反应中，则是不存在的，后来发现底物浓度的改变，对酶反应速度的影响较为复杂，1913年前后[[Michaelis]]和[[Menten]]作了大量的定量研究，积累了足够的实验证据，从酶被底物饱和的现象出发，按照中间产物设想，提出了酶促反应动力学的基本原理，并归纳为一个数学表达式，称之为米氏方程式：

[E]+[S]↔[ES]↔P+[E]

v=Vm[s]/(Km+[s])=Vm/(1+Km/[s])

式中，[E]为游离酶浓度；[S]为底物浓度；[ES]为酶与底物结合的中间络合物浓度；v为酶促反应速度；Vm为酶促反应最大速度；Km为米氏常数，是酶促反应达最大速度（Vm）一半时的底物(S)的浓度
[[File:米氏常数2.jpg|缩略图|米氏常数[https://ss0.bdstatic.com/70cFvHSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=3683003887,2917352397&fm=11&gp=0.jpg 原图链接][https://ss0.bdstatic.com/70cFvHSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=3683003887,2917352397&fm=11&gp=0.jpg 图片来源百度网]]]
'''二、Km的含义'''

Km的含义是酶促反应达最大速度（Vm）一半时的底物(S)的浓度。，即当V=Vm/2时，【S】=Km,单位为mol/l。Km是酶极为重要的动力学参数，其[[物理]]含义是指[[ES复合物]]的消失速度常数（k-1+k2）与形成速度常数（k1）之比。

'''三、Km的求法'''

[[[Km]]即是当反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。从v—[s]矩形双曲线上可得V，再从V/2处可求得Km值，但实际上，即使用很大的底物浓度，也只能得到趋近于[[V]]的反应速度，而达不到真正的V，因此测不到准确的Km值，为了得到准确的Km值，可以把米氏方程式加以改变，使之成为斜截式：y=kx+b的直线方程，然后用图解法求出Km值   。

===1.LineweaverBurk方程（双倒数作图法)===

1/V=Km+[S]/Vmax[S]改写成1/V=Km/Vmax[S]+1/Vmax

实验时选择不同的[S]测定相应的v，求出两者的倒数，以1/v对1/[S]绘出工作曲线如下图，然后利用斜率，换算出Km。

实际上，由于操作条件和操作技能所限，以及操作时准确度达不倒要求，引入误差太大等原因，常常得不到这样的一条理想的直线，那么它的[[斜率]]就不是一个定值，因而Km的值就不能直接由这种作图法求出，或求出的Km值不准确。如果令1/v=0，则1/[S]的截距为-1/Km，然后根据具体的[[数值]]，换算出Km。但这需要在实验操作的同时要进行相关的推导和计算，并且是在明确1/[S]的截距与Km关系的前提之下 <ref>[【1】 李彦华.对米氏常数求法的一点补充【J】辽宁工程技术大学学报，2006，25：335-336]</ref>  。

===2.Hanes作图法===

[S]/V=1/Vmax[S]+Km/Vmax

上式也是直线方程式，称为[[Hanes方程式]]。用[S]/V对[S]作图，所得直线的斜率为1/Vmax，[S]/V轴上的截距为Km/Vmax，而[S]轴上的截距为-Km。Hanes法的优点为数据点在坐标图中的分布较平坦，但因[S]/V包含两个变数，这就增大了误差，且统计处理也复杂得多。
[[File:米氏常数4.jpg|缩略图|米氏常数[https://ss0.bdstatic.com/70cFvHSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=1282753214,472313686&fm=26&gp=0.jpg 原图链接][https://ss0.bdstatic.com/70cFvHSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=1282753214,472313686&fm=26&gp=0.jpg 图片来源百度网]]]
==四、Km的意义与应用==

米氏常数在酶学和代谢研究中均为重要特征数据 <ref>[【2】 姚文兵.生物化学【M】北京：人民卫生出版社，2015第7版：151-153]</ref>   。

（1）同一种酶如果有几种底物，就有几个[[Km]]，其中尾值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。不同的底物有不同的Km值，这说明同一种酶对不同底物的亲和力不同。一般用1/Km近似地表示酶对底物亲和力的大小，1/Km愈大，表示酶对该底物的亲和力愈大，酶促反应易于进行。

（2）已知某个酶的Km，可计算出在某一底物浓度时，某反应速度相当于Vmax的百分率。

（3）在测定酶活性时，如果要使得测得的初速度基本上接近[[Vmax值]]，而过量的底物又不至于抑制酶活性时，一般[S]值需为Km值的10倍以上。

（4）催化可逆反应的酶，对[[正逆]]两向底物的Km往往是不同的。测定这些Km值的差别以及细胞内正逆两向底物的浓度，可以大致推测该酶催化正逆两向反应的效率，这对了解酶在细胞内的主要催化方向及生理功能有重要意义。

（5）当一系列不同的酶催化一个代谢过程的连锁反应时，如能确定各种酶的Km及其相应底物的浓度，还有助于寻找代谢过程的限速步骤。

（6）了解酶的Km值及其底物在细胞内的浓度，可以推知该酶在细胞内是否受到底物浓度的调节。如酶的Km远低于细胞内的底物浓度(低10倍以上)，说明该酶经常处于底物饱和状态，底物浓度的稍许变化不会引起反应速度有意义的改变。反之，如酶的Km大于底物浓度，则反应的速度对底物浓度的变化就十分敏感。

（7）测定不同抑制剂对某个酶Km及Vmax的影响，可以区别该[[[抑制剂]]是竞争性还是非竞争性抑制剂。

五、Km的影响因素

Km值随测定的底物种类、反应的温度、[[pH]]及[[离子]]强度而改变。


==视频==

==米氏散射：无线电与太阳光==
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==参考文献==
{{Reflist}}

[[Category:340 化學總論]]