甘露三糖
甘露三糖是一種糖類化合物，來源於熟地黃。甘露三糖是熟地黃中含量最高的寡糖成分。可通過水蘇糖水解製備得到。[1]甘露三糖具有促進造血細胞的增殖、提高免疫力、降血糖、抗腫瘤等藥理活性。
目錄
背景及概述
地黃(RehmanniaglutinosaLibosch.)在我國藥用歷史悠久，是一味重要的滋陰補腎中藥，一般以鮮地黃、生地黃和熟地黃三種形式入藥。近年來的研究證明，寡糖是地黃的重要活性成分，具有增強造血功能、促進免疫、降低血糖、增進骨代謝、抗腫瘤等作用。地黃寡糖成分較多，其中已知的寡糖包括蔗糖、楝二糖、棉子糖、甘露三糖、水蘇糖、毛蕊四糖和毛蕊糖，另外薄層層析還發現中性組分中含有8種未知糖的斑點。地黃炮製前後主要寡糖的量存在顯著變化，生地中以水蘇糖為主，熟地中以甘露三糖為主。
究竟是哪種地黃寡糖在起作用，或者說哪種寡糖在起主要作用尚不清楚。目前文獻報道，地黃中甘露三糖的分離純化方法有水提醇析法、水蘇糖水解反應法、酶催化水解反應法。水提醇析法：加4倍水，沸水浸提6h，提取2次，將水提液進行70%醇析處理後水蘇糖的含量大大降低，有利於甘露三糖的分離，為甘露三糖的精製提供了有效的工藝參數。
水蘇糖水解反應法：先用鮮地黃製備得到水蘇糖，在pH2.5、90℃和24h條件下，水蘇糖水解成為甘露三糖，90.63%的水蘇糖可以水解。水蘇糖降解生成三糖的方式有兩種：一是生成半乳糖和棉子糖，二是生成果糖和甘露三糖。酶催化水解反應法：使用β-D-呋喃糖苷酶水解水蘇糖，得到白色粉末狀的甘露三糖，酶催化水解反應具有專屬性高，條件溫和，但需嚴格控制pH條件、酶的純度，否則無法得到純度很高的單體。
綜觀上述，從地黃中直接分離製備甘露三糖單體難度大，存在製備繁瑣、甘露三糖單體純度低等問題。如何快速、高效從地黃藥材中分離純化得到甘露三糖單體成分是目前地黃研究熱點。
甘露三糖是一種天然的功能性寡糖，可以強效增殖人體腸道內有益菌群(雙歧桿菌和乳酸菌等)，具有良好的生理功能。
製備[2-3]
方法1：一種由鮮地黃製備高純度甘露三糖的方法，由如下步驟組成：
(1)鮮地黃高溫加工炮製：取採收後的鮮地黃25.0g，棄去霉爛部位，洗淨後切片，切成厚度為3cm的切片，密閉加熱至90℃保持6h；
(2)甘露三糖樣液製備：按質量比為1：2的比例將步驟(1)得到的鮮地黃加工炮製品加入70℃的水中浸提0.5h，殘渣按上述工藝繼續浸提1次，合併浸提液，真空濃縮至60。Brix的糖液，即得到甘露三糖樣液。
(3)醇沉得甘露三糖樣液醇沉部分：按體積比為1：2的比例將乙醇加入甘露三糖樣液，在溫度80℃保溫30min，自然降溫靜置24h，得甘露三糖樣液醇沉部分；
(4)除雜脫色濃縮得甘露三糖樣液：將步驟3所得到的醇沉甘露三糖樣液用水稀釋10倍，用0.5％的活性炭或大孔吸附樹脂(上樣液重量與樹脂體積比例為450g/L)脫色，過濾後在60℃條件下濃縮樣液至60。Brix；
(5)凝膠LH20柱色譜分離得到甘露三糖：將甘露三糖樣液稀釋到10。Brix，通過凝膠LH20柱色譜以25％的乙醇洗脫，以TLC檢測合併含甘露三糖的餾分，濃縮或冷凍乾燥得甘露三糖，濃縮乾燥得甘露三糖1.1g，純度98.5％，總收率4.4％。
方法2：一種用活性炭梯度洗脫從地黃提取甘露三糖單體的方法，包括如下步驟：
（1）稱取地黃根，清洗乾淨，粉碎；
（2）用乾淨地黃根量的10倍量的水超聲提取或水煎煮提取，每次1h，合併所得藥液，濾過；
（3）濾液減壓濃縮乾燥，得干浸膏；
（4）活性炭做為色譜柱固定相，取活性炭用水拌勻，濕法裝柱，所用柱內徑為3.5cm，柱長40cm；
（5）稱取浸膏，用重蒸水完全溶解後，在常壓下在1-6ml/min的流速下上活性炭色譜柱，色譜柱中活性炭的重量為浸膏重量的1-12倍；
（6）待上樣完畢，在3-8ml/min的流速下，先用重蒸水沖洗至無色，再用5%、10%、20%、15%乙醇梯度洗脫4倍-5倍量柱體積，收集15%乙醇流份；
（7）將15%乙醇洗脫溶液在壓力-5.7MPa，溫度-70℃減壓冷凍乾燥；或壓力為−0.070MPa，溫度30℃，減壓低溫加熱乾燥得甘露三糖單體產品。