Taq聚合酶

         

Taq聚合酶

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Taq聚合酶的缺点之一为催化DNA合成时的相对低保真性。它缺乏3’→5’核酸外切酶的即时校正机制，出错率为1/90000。

目录

应用

水生栖热菌是一种生长在温泉、蒸汽管道等处的细菌，它体内的Taq聚合酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，这在需要高温环境的PCR反应中有着重要意义。因此Taq聚合酶取代了之前常用于PCR反应的大肠埃希菌中的DNA聚合酶。PCR反应中应用Taq聚合酶，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷，大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

一般适用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等，产物可直接用于T-A克隆载体。

酶单位

1单位（U）Taq DNA 聚合酶活力定义为在74°C、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不容物质所需的酶量。

发现

托马斯·D·布洛克(Thomas D. Brock)团队于1965年在美国黄石公园里热泉中发现并成功分离嗜热细菌海栖热袍菌(Thermus aquaticus)。Taq聚合酶是我国台湾科学家钱嘉韵女士所分离，钱嘉韵是第一个报道分离耐高温DNA聚合酶工作的，1973年，钱嘉韵(Alice Chien)就读于美国俄亥俄州辛辛那提大学生物系，她的导师对Thermus aquaticus十分好奇，就让钱嘉韵以该细菌作为研究主题。在另一位老师的指导下，钱学会了从细胞中分离蛋白质，成功分离出该细菌耐高温的TaqDNA聚合酶。Taq聚合酶是从嗜热细菌海栖热袍菌（Thermus aquaticus）中分离出的DNA聚合酶。

Chien A, Edgar DB, Trela JM (1976)."Deoxyribonucleic acid polymerase from the extreme

thermophile Thermus aquaticusJ. Bact.127(3): 1550–7.

Brock, Thomas D.; Hudson Freeze (August 1969)."Thermus aquaticus gen. n. and sp. n., a

nonsporulating extreme thermophile"Journal of Bacteriology(American Society for

Microbiology)98(1): 289–297.

Brock, Thomas D. (15 May 1964). "Knots in Leucothrix mucor".Science144(3620): 870–872.