双水相萃取

双水相萃取对于传统有机相-水相的溶剂萃取来说是个全新的替代品。当两种聚合物、一种聚合物与一种亲液盐或是两种盐（一种是离散盐且另一种是亲液盐）在适当的浓度或是在一个特定的温度下相混合在一起时就形成了双水相系统。

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目录

操作步骤

一、重点双水相萃取放大容易：一般10ml离心管的实验结果可直接放大到工业规模。具体实验步骤：1、配制一系列不同浓度、pH及离子强度的双水相，每个双水相改变一个参数。2、加入料液，再加水使整个系统质量达到5~10g。离心管封口后充分混合。3、1800－2000g下离心3－5min，使两相完全分离。4、用吸管或移液管将上相和下相分别吸出，测定上、下相中目标产物的浓度或生物活性，计算分配系数。5、上、下两相中目标产物的总量应与加入量对比，以检验是否存在沉淀或界面吸附现象，并可确认浓度或活性测定中产生的系统误差。6、分析目标产物的收率和纯化倍数，确定最佳双水相系统。二、特点：1、含水量高（70%～90%），适宜提取水溶性的蛋白质、酶等生物活性物质，且不易引起蛋白质的变性失活。2、不存在有机溶剂残留问题。3、易于放大，各种参数可按比例放大而产物收率并不降低。这是其他分离技术无法比拟的。萃取是在两个液相间进行。大部分萃取采用一个是水相。另一个是有机相。但有机相易使蛋白质等生物活性物质变性。最近，发现有一些高分子水溶液（如分子量从几千到几万的聚乙二醇硫酸盐水溶液）可以分为两个水相，蛋白质在两个水相中的溶解度有很大的差别。故可以利用双水相萃取过程分离蛋白质等溶于水的生物产品。例如用聚乙二醇（PEG Mr为6000）/磷酸钾系统从大肠杆菌匀浆中提取β-半乳糖苷酶。这是一个很有前途的新的分离方法，特别适用于生物工程得出的产品的分离。

应用

1、蛋白质、酶的纯化 2、多肽的分离纯化 3、核酸的分离纯化