补体结合试验

原图链接医生在线

补体的测定包括测定补体总量、溶血活性、单个补体成份和补体片段量以及补体参与试验等。利用抗原抗体复合物同补体结合，把含有已知浓度的补体反应液中的补体消耗掉使浓度减低的现象，以检出抗原或抗体的试验，为高敏度检出方法之一，特别是根据抗原物质的特性，抗原抗体反应不能用沉淀反应或凝集反应观察时也可以利用此法。

目录

临床意义

异常结果：>1∶10为阳性，诊断布氏杆菌病符合率为97.96%。

补体结合试验可应用在以下几方面：

①传染病诊断。病原性抗原及相应抗体的检测。

②其他抗原的检测。例如肿瘤相关抗原、血迹中的蛋白质鉴定、HLA分型等。

③自身抗体检测。

正常值

正常值：0～1∶10。

注意事项

操作应仔细准确;玻璃器材必须非常清洁;参与试验的各项已知成分必须预先滴定其效价，配制成规定的浓度使用，才能保证结果可靠。

检查过程

(1)血素的滴定：

①取补体1ml，加BBS9ml，依次稀释成1∶20，1∶30，1∶40，1∶50，1∶60，1∶80，1∶100，1∶200，1∶400，同时取50%的溶血素0.2ml，加BBS9.8ml，即为1∶100的溶血素，然后继续稀释成1∶800，1∶1600，1∶3200，1∶6400。

②采取方阵排列试管，纵行各管加不同浓度的补体0.1ml，横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后，各管加BBS 0.2ml，补体和溶血素对照管各加BBS 0.3ml，最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml。各管总量为0.5ml，摇匀，放37℃水箱中30min，观察结果。

以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位。在实际应用时，溶血素用2U(3200÷2=1600)，补体用2.5U(80÷2.5=32)。

(2)正式试验：

①用V型微量反应板操作，每份标本作一个试验孔。一个血清对照孔。各孔内先加BBS 0.025ml。

②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔，旋转后移入第二孔，共八孔，如此可得1∶2～1∶256稀释。

以小量法测定抗体的补体结合试验为例。逐步加入各种试剂，温育后先观察各类对照管，应与预期的结果吻合。阴性、阳性对照管中应分别为明确的溶血与不溶血;抗体或抗原对照管、待检血清对照管、阳性和阴性对照的对照管都应完全溶血。绵羊红细胞对照管不应出现自发性溶血。补体对照管应呈现2U为全溶，1U为全溶略带有少许红细胞，0.5U应不溶。如0.5U补体对照出现全溶表明补体用量过多;如2U对照管不出现溶血，说明补体用量不够，对结果都有影响，应重复进行试验。补体结合试验结果，受检血清不溶血为阳性，溶血为阴性。

不适宜人群

无检查适应症者不宜做此项检查。

不良反应与风险

一般无并发症和危害。