補體結合試驗

原圖鏈接醫生在線

補體的測定包括測定補體總量、溶血活性、單個補體成份和補體片段量以及補體參與試驗等。利用抗原抗體複合物同補體結合，把含有已知濃度的補體反應液中的補體消耗掉使濃度減低的現象，以檢出抗原或抗體的試驗，為高敏度檢出方法之一，特別是根據抗原物質的特性，抗原抗體反應不能用沉澱反應或凝集反應觀察時也可以利用此法。

目錄

臨床意義

異常結果：>1∶10為陽性，診斷布氏桿菌病符合率為97.96%。

補體結合試驗可應用在以下幾方面：

①傳染病診斷。病原性抗原及相應抗體的檢測。

②其他抗原的檢測。例如腫瘤相關抗原、血跡中的蛋白質鑑定、HLA分型等。

③自身抗體檢測。

正常值

正常值：0～1∶10。

注意事項

操作應仔細準確;玻璃器材必須非常清潔;參與試驗的各項已知成分必須預先滴定其效價，配製成規定的濃度使用，才能保證結果可靠。

檢查過程

(1)血素的滴定：

①取補體1ml，加BBS9ml，依次稀釋成1∶20，1∶30，1∶40，1∶50，1∶60，1∶80，1∶100，1∶200，1∶400，同時取50%的溶血素0.2ml，加BBS9.8ml，即為1∶100的溶血素，然後繼續稀釋成1∶800，1∶1600，1∶3200，1∶6400。

②採取方陣排列試管，縱行各管加不同濃度的補體0.1ml，橫排各管加溶血素0.1ml(皆應從最高稀釋度加起)混勻後，各管加BBS 0.2ml，補體和溶血素對照管各加BBS 0.3ml，最後在各管中加2%羊紅細胞0.1ml。各管總量為0.5ml，搖勻，放37℃水箱中30min，觀察結果。

以完全溶血的補體和溶血素最高稀釋度為各自的單位。在實際應用時，溶血素用2U(3200÷2=1600)，補體用2.5U(80÷2.5=32)。

(2)正式試驗：

①用V型微量反應板操作，每份標本作一個試驗孔。一個血清對照孔。各孔內先加BBS 0.025ml。

②用稀釋棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔，旋轉後移入第二孔，共八孔，如此可得1∶2～1∶256稀釋。

以小量法測定抗體的補體結合試驗為例。逐步加入各種試劑，溫育後先觀察各類對照管，應與預期的結果吻合。陰性、陽性對照管中應分別為明確的溶血與不溶血;抗體或抗原對照管、待檢血清對照管、陽性和陰性對照的對照管都應完全溶血。綿羊紅細胞對照管不應出現自發性溶血。補體對照管應呈現2U為全溶，1U為全溶略帶有少許紅細胞，0.5U應不溶。如0.5U補體對照出現全溶表明補體用量過多;如2U對照管不出現溶血，說明補體用量不夠，對結果都有影響，應重複進行試驗。補體結合試驗結果，受檢血清不溶血為陽性，溶血為陰性。

不適宜人群

無檢查適應症者不宜做此項檢查。

不良反應與風險

一般無併發症和危害。