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LB培养基

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中文名: LB培养基 外文名: LB Culture 来源于: lysogeny broth，即溶菌肉汤 发明人: 贝尔塔尼(Bertani) 全 称: Luria-Bertani培养基 分 类: 液态培养基、固态培养基 成 分: 胰化蛋白胨，NaCl ，酵母膏，水 条 件: pH7.4

LB培养基是一种培养基的名称，生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种，使菌种成倍扩增，达到使用要求。也可用于培养基因工程受体菌（大肠杆菌）。可分为液体培养基和固体培养基。LB一般被解释为Luria-Bertani培养基，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语的lysogeny broth，即溶菌肉汤。

简介

肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。而LB培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。两者都属于半合成培养基。肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。而LB培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl。高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。

根据《分子克隆实验指南》（J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著）配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:

胰蛋白胨10g

酵母提取物5g

NaCl 10g

摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.

培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础.

LB培养基的配方如下:

胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L

酵母提取物(Yeast extract) 5g/L

氯化钠(NaCl) 10g/L

另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)

固态培养基

LB固体培养基1L和液体一样，加15g~20g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗生素，并且倒好板。

倒板

1.配制：100mlLB培养基加入1~1.5g琼脂粉

2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置于55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。

3.倒板：一般15ml-20ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。

4.保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。

ph值需要控制在7.4

LB一般被解释为Luria-Bertani，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤。LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。

LB培养基的配制方法及使用

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。

酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。

胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。

酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。<a href=http://www.huankai.com/>固体培养基</a>http://www.huankai.com/中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。

LB培养基配方(每升)

酵母提取物 5g

胰化蛋白胨 10g

氯化钠 10g

NaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌。

LB固体培养基

LB培养基 1L

琼脂粉 15g

NaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌。

有时需在培养基中添加抗生素，琼脂凝固点为40℃，所以添加抗生素最好在50～55℃。

LB培养基用途

用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。

LB培养基使用原理：

蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。

LB培养基配制方法

配制每升培养基，应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。

LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素，并且倒好板。