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武汉长江隧道北起江岸区大智路与铭新街交叉口，下跨长江水道，南至武昌区友谊大道南侧沙湖路，距武汉长江二桥约3.1千米，距武汉长江公铁隧道约1.8千米，距鹦鹉洲长江大桥约2千米，距武汉长江大桥约7千米。线路先后下穿中山大道、胜利街、鲁兹故居、汉口江滩公园入口、临江大道、和平大道、友谊大道。