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當越獄逃脫的政治犯安吉羅提（Cesare Angelotti，男低音）衝進聖安德 肋 樂 聖殿（Church of Sant' Andrea della Valle）內的阿塔凡蒂侯爵家的禮拜堂躲好時， 教堂裡 一位 教堂 年邁的 執事 步履 蹣跚 地 走進來，祈禱的鐘聲 此時 正 好 巧 響起。不久，教堂內 畫 壁畫的畫家卡瓦拉多希（男高音Mario Cavaradossi飾演）進來， 他 掀開畫布繼續 作畫， 畫 中女主人 以安吉羅提的姐姐、侯爵夫人瑪格達萊娜為形象的瑪利亞（Mary Magdalene） 。卡瓦拉多希從懷中拿出自己的情人女歌手托斯卡（Floria Tosca，女高音）的小肖像來跟畫像比較，一個是黑眼珠，一個金髮碧眼，同樣美麗（Recondita Armonia，奇妙的和諧，此旋律後來變成了侯爵夫人瑪格達萊娜的動機）。一旁的教堂執事抱怨著離開。安吉羅提從禮拜堂中露出了臉，他很高興能夠和以前的同志卡瓦拉多希再次見面，卡瓦拉多希激動的拿食物給他，當聽到托斯卡的聲音，安吉羅提趕緊又藏起來 。

托斯卡是個忌妒心強的女人，她懷疑 卡瓦拉多希 背著她跟別 從懷中拿出自己 的 情人女歌手托斯卡（Floria Tosca， 女 人 高音）的小肖像 來 往 跟畫像比較，一個是黑眼珠 ， 看到畫中藍色 一個金髮碧 眼 睛 ，兩人同樣美麗（Recondita Armonia，奇妙 的 和諧，此旋律後來變成了 侯爵夫人 更有懷疑 瑪格達萊娜 的 理由（Mario!Mario!Mario! 動機 ） 。安吉羅提從禮拜堂中露出了臉 ， 高興能夠和以前的同志 卡瓦拉多希 微笑著向她解釋，讓她能夠平靜下來（Qual`occhio al Mondo），並說定晚上音樂會後 再次見面 ， 在他郊外的小屋相見。她走後 卡瓦拉多希 招呼 拿食物給他，心情激動， 安吉羅提 出來，告訴他小屋 聽到托斯卡 的 去路，並說如遇危險可以躲在花園的古井中。外面響起了通知有人越獄的炮 聲 ，兩個人立刻離開教堂。同時，教堂執事帶著唱詩班的孩子們進來，他們喧鬧著，因為有人說羅馬軍隊已把拿破崙（Napoleon） 音 趕 出 緊又藏 了 義大利 起來 。

當前來搜尋安吉羅提 托斯卡是個忌妒心強 的 秘密警察局長斯 女人，她懷疑 卡 皮亞男爵（Baron Scarpia 瓦拉多希背著她跟別的女人來往 ， 男 畫 中 音）出現時，大家都安靜了，他在侯爵家 藍色眼睛 的 禮拜堂里發現了 侯爵夫人 的扇子以及吃完食物的空盒子（此時奇妙的和諧之旋律再度出現 讓她更起疑竇（Mario!Mario!Mario!），卡瓦拉多希微笑著向她解釋，讓她平靜下來（Qual`occhio al Mondo ）， 而牆壁 並說定晚 上 的瑪利亞畫像則告訴了 音樂會後要在 他 畫這幅像 郊外 的 人就是 小屋相見。在托斯卡走後， 卡瓦拉多希 趕緊招呼安吉羅提出來，告訴他小屋的去路，並說如果遇到危險，可以躲在花園的古井中 。

說著說著，外面響起了通知有人越獄的炮聲，兩個人立刻離開教堂。同時，教堂執事帶著唱詩班的孩子們進來，他們喧鬧著，因為有人說羅馬軍隊已把拿破崙（Napoleon）趕出了義大利。 當前來搜尋安吉羅提的秘密警察局長斯卡皮亞男爵（Baron Scarpia，男中音）出現時，大家都安靜了，他在侯爵家的禮拜堂里發現了侯爵夫人的扇子以及吃完食物的空盒子（此時奇妙的和諧之旋律再度出現），而牆壁上的瑪利亞畫像則告訴了他，畫這幅像的人正是卡瓦拉多希。 托斯卡由於不放心又回來找卡瓦拉多希，但卻遇到曾經垂涎於她的斯卡皮亞，她 的臉上 露出厭惡的表情，但心懷詭計的警察局長熱情迎上前向她問好。   斯卡皮亞把自己剛剛找到的侯爵夫人的扇子拿給托斯卡看，並極力的添油加醋，認為卡瓦拉多希背叛自己的托斯卡流著眼淚發誓要報復。托斯卡離開，教堂里漸漸人多起來，人們來做禱告。斯卡皮亞派人跟蹤托斯卡，看著落入他圈套的女人，斯卡皮亞 奸 笑起來， 那 聲音令人毛骨悚然（Va，Tosca!）。