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在法爾內塞宮樓上的秘密警察局長的房間裡，斯卡皮亞邊吃飯邊幻想著能夠按照自己意願征服托斯卡時的那種 幾近 病態 的 快感（Ha pi Forte Sapore）。

這時 跟蹤托斯卡的人回來 了 ，他報告說沒有發現安吉羅提，但抓來了卡瓦拉多希。樓下正在舉行皇家慶祝活動，傳來了托斯卡的歌聲，音樂會結束後，托斯卡上來，斯卡皮亞吩咐將卡瓦拉多希帶到隔壁的房間。聽到 驕傲的 卡瓦拉多希受到酷刑所發出的呻吟聲，托斯卡再也受不了了，她說出了安吉羅提的藏身之處。卡瓦拉多希被帶出來後，意識到發生了什麼事，他嚴厲指責托斯卡。這時一個官員衝進來說拿破崙 已經 打贏了 這場 戰爭（Battle of Marengo），卡瓦拉多希情不自禁的歡呼勝利（Vittoria!）。

斯卡皮亞命令將他押入大牢。看看托斯卡，斯卡皮亞邪惡的微笑著走向她，表示她可以用自己來換得卡瓦拉多希的生命，托斯卡推開他。可憐的 女人在心中 托斯卡 向上帝訴求，為何她的命運如此悲慘（Vissi d`arte，為了藝術為了愛）。一個秘密警察進來報告說在圍捕過程中安吉羅提輕生了。

托斯卡低著頭臉色蒼白，她對斯卡皮亞表示願意屈服，斯卡皮亞答應只是形式上的處決卡瓦拉多希，暗地裡再將他放走，托斯卡要求他再寫一張通行證給他們。當斯卡皮亞簽字的時候，托斯卡拿起桌上的一把餐刀 ， 刺進 了 斯卡皮亞的身體，並從他漸漸堅硬的手指中拿出通行證，在他的頭邊點了一根蠟燭，放一個小十字架在他的胸口，托斯卡逃離 了 房間。