補體結合試驗檢視原始碼討論檢視歷史
補體的測定包括測定補體總量、溶血活性、單個補體成份和補體片段量以及補體參與試驗等。利用抗原抗體複合物同補體結合,把含有已知濃度的補體反應液中的補體消耗掉使濃度減低的現象,以檢出抗原或抗體的試驗,為高敏度檢出方法之一,特別是根據抗原物質的特性,抗原抗體反應不能用沉澱反應或凝集反應觀察時也可以利用此法。
臨床意義
異常結果:>1∶10為陽性,診斷布氏桿菌病符合率為97.96%。
補體結合試驗可應用在以下幾方面:
①傳染病診斷。病原性抗原及相應抗體的檢測。
②其他抗原的檢測。例如腫瘤相關抗原、血跡中的蛋白質鑑定、HLA分型等。
③自身抗體檢測。
正常值
正常值:0~1∶10。
注意事項
操作應仔細準確;玻璃器材必須非常清潔;參與試驗的各項已知成分必須預先滴定其效價,配製成規定的濃度使用,才能保證結果可靠。[1]
檢查過程
(1)血素的滴定:
①取補體1ml,加BBS9ml,依次稀釋成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同時取50%的溶血素0.2ml,加BBS9.8ml,即為1∶100的溶血素,然後繼續稀釋成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。
②採取方陣排列試管,縱行各管加不同濃度的補體0.1ml,橫排各管加溶血素0.1ml(皆應從最高稀釋度加起)混勻後,各管加BBS 0.2ml,補體和溶血素對照管各加BBS 0.3ml,最後在各管中加2%羊紅細胞0.1ml。各管總量為0.5ml,搖勻,放37℃水箱中30min,觀察結果。
以完全溶血的補體和溶血素最高稀釋度為各自的單位。在實際應用時,溶血素用2U(3200÷2=1600),補體用2.5U(80÷2.5=32)。
(2)正式試驗:
①用V型微量反應板操作,每份標本作一個試驗孔。一個血清對照孔。各孔內先加BBS 0.025ml。
②用稀釋棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋轉後移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀釋。
以小量法測定抗體的補體結合試驗為例。逐步加入各種試劑,溫育後先觀察各類對照管,應與預期的結果吻合。陰性、陽性對照管中應分別為明確的溶血與不溶血;抗體或抗原對照管、待檢血清對照管、陽性和陰性對照的對照管都應完全溶血。綿羊紅細胞對照管不應出現自發性溶血。補體對照管應呈現2U為全溶,1U為全溶略帶有少許紅細胞,0.5U應不溶。如0.5U補體對照出現全溶表明補體用量過多;如2U對照管不出現溶血,說明補體用量不夠,對結果都有影響,應重複進行試驗。補體結合試驗結果,受檢血清不溶血為陽性,溶血為陰性。[2]
不適宜人群
無檢查適應症者不宜做此項檢查。
不良反應與風險
一般無併發症和危害。
參考文獻
- ↑ 補體結合試驗微信
- ↑ 三大經典血清學試驗指補體結合試驗和什麼,什麼搜狗問問