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隐孢子虫(Cryptosporidium Tyzzer,1907)为体积微小的球虫类寄生虫。广泛存在多种脊椎动物体内,寄生于人和大多数哺乳动物的主要为微小隐孢子虫(C.parvum),由微小隐孢子虫引起的疾病称隐孢子虫病(cryptosporidiosis),是一种以腹泻为主要临床表现的人畜共患性原虫病。[1]

形态

卵囊呈圆形或椭圆形,直径4~6μm,成熟卵囊内含4个裸露的子孢子和残留体(residual body)。子孢子呈月牙形,残留体由颗粒状物和一空泡组成。在改良抗酸染色标本中,卵囊为玫瑰红色,背景为蓝绿色,对比性很强,囊内子孢子排列不规则,形态多样,残留体为暗黑(棕)色颗粒状。

生活史

隐孢子虫完成整个生活史只需一个宿主。生活史简单,可分为裂殖生殖,配子生殖和孢子生殖三个阶段。虫体在宿主体内的发育时期称为内生阶段。随宿主粪便排出的成熟卵囊为感染阶段。人和许多动物都是本虫的易感宿主,当宿主吞食成熟卵囊后,在消化液的作用下,子孢子在小肠脱囊而出,

先附着于肠上皮细胞,再侵入其中,在被侵入的胞膜下与胞质之间形成带虫空泡,虫体在空泡内开始无性繁殖,先发育为滋养体,经3次核分裂发育为Ⅰ型裂殖体。成熟的Ⅰ型裂殖体含有8个裂殖子。裂殖子被释出后侵入其它上皮细胞,发育为第二代滋养体。第二代滋养体经2次核分裂发育为Ⅱ型裂殖体。成熟的Ⅱ型裂殖体含4个裂殖子。此裂殖子释出后侵入肠上皮发育为雌、雄配子体,进入有性生殖阶段,雌配子体进一步发育为雌配子,雄配子体产生16个雄配子,雌雄配子结合形成合子,进入孢子生殖阶段。合子发育为卵囊。卵囊有薄壁和厚壁两种类型,薄壁卵囊约占20%,仅有一层单位膜,其子孢子逸出后直接侵入宿主肠上皮细胞,继续无性繁殖,形成宿主自身体内重复感染;厚壁卵囊约占80%,在宿主细胞内或肠腔内孢子化(形成子孢子)。孢子化的卵囊随宿主粪便排出体外,即具感染性。完成生活史约需5~11天。[2]

致病

本虫主要寄生于小肠上皮细胞的刷状缘纳虫空泡内。空肠近端是虫体寄生数量最多的部位,严重者可扩散到整个消化道。亦可寄生在呼吸道、肺脏、扁桃体、胰腺、胆囊和胆管等器官。

寄生于肠粘膜的虫体,使粘膜表面出现凹陷,或呈火山口状。寄生数量多时,可导致广泛的肠上皮细胞的绒毛萎缩、变短、变粗、或融合、移位和脱落,上皮细胞老化和脱落速度加快。固有层多形核白细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。此外,艾滋病患者并发隐孢子虫性胆囊炎、胆管炎时,除呈急性炎症改变外,尚可引起坏疽样坏死。隐孢子虫的致病机理尚未完全澄清,很可能与多种因素有关。小肠粘膜的广泛受损,肠粘膜表面积减少,破坏了肠道吸收功能,特

别是脂肪和糖类吸收功能严重障碍,导致患者严重持久的腹泻,大量水及电解质从肠道丢失。此外,由于隐孢子虫感染缩小了肠粘膜表面积,使得多种粘膜酶明显减少,例如乳糖酶,这也是引起腹泻的原因之一。临床症状的严重程度与病程长短亦取决于宿主的免疫功能状况。免疫功能正常宿主的症状一般较轻,潜伏期一般为3~8天,急性起病,腹泻为主要症状,大便呈水样或糊状,一般无脓血,日排便2~20余次。严重感染的幼儿可出现喷射性水样便,量多。常伴有痉挛性腹痛、腹胀、恶心、呕吐、食欲减退或厌食、口渴和发热。病程多为自限性,持续7~14天,但症状消失后数周,粪便中仍可带有卵囊。少数病人迁延1~2个月或转为慢性反复发作。免疫缺陷宿主的症状重,常为持续性霍乱样水泻,每日腹泻数次至数十次,量多,达数升至数十升。常伴剧烈腹痛,水、电解质紊乱和酸中毒。病程可迁延数月至1年。病人常并发肠外器官隐孢子虫病,如呼吸道和胆道感染,使得病情更为严重复杂。隐孢子虫感染常为AIDS病人并发腹泻而死亡的原因。[3]

实验诊断

病原学诊断

粪便(水样或糊状便为好)直接涂片染色,检出卵囊即可确诊。有时呕吐物和痰也可作为受检标本。检查方法有:

  1. 金胺-酚染色法:新鲜或甲醛固定后的标本均可用此法,染色后在荧光显微镜下观察。卵囊圆形呈明亮乳白-黄绿色荧光。低倍镜下为圆形小亮点,周边光滑,虫体数量多时可遍布视野,犹如夜空中繁星。高倍镜下卵囊壁薄,中央淡染,似环状。本法简便、敏感,适用于批量标本的过筛检查。
  2. 改良抗酸染色法:染色后背景为蓝绿色,卵囊呈玫瑰色,圆形或椭圆形,囊壁薄,内部可见1~4个梭形或月牙形子孢子,有时尚可见棕色块状的残留体。但粪便标本中多存在红色抗酸颗粒,形同卵囊,难以鉴别。
  3. 金胺酚-改良抗酸染色法:先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色复染,用光学显微镜检查,卵囊形态同抗酸染色所示,但非特异性颗粒呈蓝黑色,颜色与卵囊不同,有利于查找卵囊,优化了改良抗酸染色法,提高了检出率。
  4. 基因检测:采用PCR和DNA探针技术检测隐孢子虫特异DNA,具有特异性强、敏感性高的特点。在PCR中使用相应的引物,可扩增出隐孢子虫DNA特异的452bp片段,其敏感性可达0.1pg水平。[4]

免疫学诊断

隐孢子虫病的免疫学诊断近年发展较快,具有弥补粪检不足的优点。

  1. 粪便标本的免疫诊断:均需采用与卵囊具高亲和力的单克隆抗体。在IFAT的检测中卵囊在荧光显微镜下呈明亮黄绿色荧光,特异性高、敏感性好。适用于对轻度感染者的诊断和流行病学调查。采用ELISA技术检测粪便中的卵囊抗原,敏感性、特异性均好,勿需显微镜。流式细胞计数法可用于卵囊计数,考核疗效。
  2. 血清标本的免疫诊断:常采用IFAT、ELISA和酶联免疫印迹试验(ELIB),特异性、敏感性均较高,可用于隐孢子虫病的辅助诊断和流行病学调查。

流行分布

隐孢子虫病呈世界性分布。迄今已有74个国家,至少300个地区有报道。各地感染率高低不一,一般发达国家或地区感染率低于发展中国家或地区。在腹泻患者中,欧洲、北美洲隐孢子虫检出率为0.6%~20%,亚洲、大洋州、非洲和中南美洲为3%~32%。很多报道认为,隐孢子虫的发病率与当地的空肠弯曲菌、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌和蓝氏贾第鞭毛虫相近,在寄生虫性腹泻中占首位。同性恋并发艾滋病患者近半数感染隐孢子虫。在与病人、病牛接触的人群和在幼儿集中的单位,隐孢子虫腹泻暴发流行时有发生。

国内韩范于1987年在南京首先发现了人体隐孢子虫病病例。随后安徽内蒙福建等19个省区也相继报道了一些病例,截止到1998年,据不完全统计已超过千例。在腹泻患者中的检出率为0.9%~13.3%。

隐孢子虫病流行具备下列特点:2岁以下的婴幼儿发病率较高,男女间无明显差异;温暖潮湿季节发病率较高;农村多于城市,沿海港口多于内地;经济落后、卫生状况差的地区多于发达地区;畜牧地区多于非牧区;旅游者多于非旅游者。

流行环节

  1. 传染源 :感染了隐孢子虫的人和动物都是传染源,已知40多种动物,包括哺乳类动物,如牛、羊、犬、猫等均可作为该虫的保虫宿主。隐孢子虫病人和带虫者的粪便和呕吐物中均含有卵囊,都是重要的传染源。
  2. 传播途径:本病为人畜共患性疾病,人与动物可以相互传播,但人际的相互接触是人体隐孢子虫病最重要的传播途径。传播可发生于直接或间接与粪接触,食用含隐孢子虫卵囊污染的食物或水是主要传播方式。

近年来,英、美等国均有水源污染引起暴发流行的报道,如只有6万人口的佐治亚洲,有13,000人发生了胃肠炎,其中39%粪检卵囊阳性。旅游者亦常通过饮用污染的水源而造成暴发流行。此外,同性恋者之间的肛交也可导致本虫传播,痰中有卵囊者可通过飞沫传播。

易感人群

人对隐孢子虫普遍易感。婴幼儿、艾滋病患者、接受免疫抑制剂治疗的病人以及免疫功能低下者更易感染。在欧美、大约11%~21%的艾滋病患者腹泻便中发现该虫卵囊,而在非洲等发展中国家可达12%~48%。

本段防治

应防止病人、病畜及带虫者的粪便污染食物和饮水,注意粪便管理和个人卫生,保护免疫功能缺陷或低下的人,增强其免疫力,避免与病人病畜接触。凡接触病人病畜者,应及时洗手消毒;因卵囊的抵抗力强,病人用过的便盆等必须在3%漂白粉中浸泡30分钟后,才能予以清洗。10%福尔马林、5%氨水可灭活卵囊。 此外, 65~70℃加热30分钟可灭活卵囊,因此应提倡喝烧开过的水。

隐孢子虫病至今尚无特效治疗药。一般认为对免疫功能正常患者,应用对症和支持疗法,纠正水、电解质紊乱可取得良好的效果。对免疫功能受损者,恢复其免疫功能、及时停用免疫抑制剂药物则是主要措施,否则治疗大多无效。国外目前有用螺旋霉素巴龙霉素治疗者。用人工高免疫牛初乳(hyperimmune bovine colostrum, HBC)、牛乳球蛋白、牛转移因子治疗也获得疗效。国内用大蒜素治疗,有一定效果。

环境标准

生活饮用水卫生标准GB5749-2006 表3 水质非常规指标与限值 隐孢子虫(个/10L)<1

视频

孢子虫病(1) 判断与治疗

视频

隐孢子虫(1)

参考文献