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隱孢子蟲(Cryptosporidium Tyzzer,1907)為體積微小的球蟲類寄生蟲。廣泛存在多種脊椎動物體內,寄生於人和大多數哺乳動物的主要為微小隱孢子蟲(C.parvum),由微小隱孢子蟲引起的疾病稱隱孢子蟲病(cryptosporidiosis),是一種以腹瀉為主要臨床表現的人畜共患性原蟲病。[1]

形態

卵囊呈圓形或橢圓形,直徑4~6μm,成熟卵囊內含4個裸露的子孢子和殘留體(residual body)。子孢子呈月牙形,殘留體由顆粒狀物和一空泡組成。在改良抗酸染色標本中,卵囊為玫瑰紅色,背景為藍綠色,對比性很強,囊內子孢子排列不規則,形態多樣,殘留體為暗黑(棕)色顆粒狀。

生活史

隱孢子蟲完成整個生活史只需一個宿主。生活史簡單,可分為裂殖生殖,配子生殖和孢子生殖三個階段。蟲體在宿主體內的發育時期稱為內生階段。隨宿主糞便排出的成熟卵囊為感染階段。人和許多動物都是本蟲的易感宿主,當宿主吞食成熟卵囊後,在消化液的作用下,子孢子在小腸脫囊而出,

先附着於腸上皮細胞,再侵入其中,在被侵入的胞膜下與胞質之間形成帶蟲空泡,蟲體在空泡內開始無性繁殖,先發育為滋養體,經3次核分裂發育為Ⅰ型裂殖體。成熟的Ⅰ型裂殖體含有8個裂殖子。裂殖子被釋出後侵入其它上皮細胞,發育為第二代滋養體。第二代滋養體經2次核分裂發育為Ⅱ型裂殖體。成熟的Ⅱ型裂殖體含4個裂殖子。此裂殖子釋出後侵入腸上皮發育為雌、雄配子體,進入有性生殖階段,雌配子體進一步發育為雌配子,雄配子體產生16個雄配子,雌雄配子結合形成合子,進入孢子生殖階段。合子發育為卵囊。卵囊有薄壁和厚壁兩種類型,薄壁卵囊約占20%,僅有一層單位膜,其子孢子逸出後直接侵入宿主腸上皮細胞,繼續無性繁殖,形成宿主自身體內重複感染;厚壁卵囊約占80%,在宿主細胞內或腸腔內孢子化(形成子孢子)。孢子化的卵囊隨宿主糞便排出體外,即具感染性。完成生活史約需5~11天。[2]

致病

本蟲主要寄生於小腸上皮細胞的刷狀緣納蟲空泡內。空腸近端是蟲體寄生數量最多的部位,嚴重者可擴散到整個消化道。亦可寄生在呼吸道、肺臟、扁桃體、胰腺、膽囊和膽管等器官。

寄生於腸粘膜的蟲體,使粘膜表面出現凹陷,或呈火山口狀。寄生數量多時,可導致廣泛的腸上皮細胞的絨毛萎縮、變短、變粗、或融合、移位和脫落,上皮細胞老化和脫落速度加快。固有層多形核白細胞、淋巴細胞和漿細胞浸潤。此外,艾滋病患者並發隱孢子蟲性膽囊炎、膽管炎時,除呈急性炎症改變外,尚可引起壞疽樣壞死。隱孢子蟲的致病機理尚未完全澄清,很可能與多種因素有關。小腸粘膜的廣泛受損,腸粘膜表面積減少,破壞了腸道吸收功能,特

別是脂肪和糖類吸收功能嚴重障礙,導致患者嚴重持久的腹瀉,大量水及電解質從腸道丟失。此外,由於隱孢子蟲感染縮小了腸粘膜表面積,使得多種粘膜酶明顯減少,例如乳糖酶,這也是引起腹瀉的原因之一。臨床症狀的嚴重程度與病程長短亦取決於宿主的免疫功能狀況。免疫功能正常宿主的症狀一般較輕,潛伏期一般為3~8天,急性起病,腹瀉為主要症狀,大便呈水樣或糊狀,一般無膿血,日排便2~20餘次。嚴重感染的幼兒可出現噴射性水樣便,量多。常伴有痙攣性腹痛、腹脹、噁心、嘔吐、食慾減退或厭食、口渴和發熱。病程多為自限性,持續7~14天,但症狀消失後數周,糞便中仍可帶有卵囊。少數病人遷延1~2個月或轉為慢性反覆發作。免疫缺陷宿主的症狀重,常為持續性霍亂樣水瀉,每日腹瀉數次至數十次,量多,達數升至數十升。常伴劇烈腹痛,水、電解質紊亂和酸中毒。病程可遷延數月至1年。病人常並發腸外器官隱孢子蟲病,如呼吸道和膽道感染,使得病情更為嚴重複雜。隱孢子蟲感染常為AIDS病人並發腹瀉而死亡的原因。[3]

實驗診斷

病原學診斷

糞便(水樣或糊狀便為好)直接塗片染色,檢出卵囊即可確診。有時嘔吐物和痰也可作為受檢標本。檢查方法有:

  1. 金胺-酚染色法:新鮮或甲醛固定後的標本均可用此法,染色後在熒光顯微鏡下觀察。卵囊圓形呈明亮乳白-黃綠色熒光。低倍鏡下為圓形小亮點,周邊光滑,蟲體數量多時可遍布視野,猶如夜空中繁星。高倍鏡下卵囊壁薄,中央淡染,似環狀。本法簡便、敏感,適用於批量標本的過篩檢查。
  2. 改良抗酸染色法:染色後背景為藍綠色,卵囊呈玫瑰色,圓形或橢圓形,囊壁薄,內部可見1~4個梭形或月牙形子孢子,有時尚可見棕色塊狀的殘留體。但糞便標本中多存在紅色抗酸顆粒,形同卵囊,難以鑑別。
  3. 金胺酚-改良抗酸染色法:先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色復染,用光學顯微鏡檢查,卵囊形態同抗酸染色所示,但非特異性顆粒呈藍黑色,顏色與卵囊不同,有利於查找卵囊,優化了改良抗酸染色法,提高了檢出率。
  4. 基因檢測:採用PCR和DNA探針技術檢測隱孢子蟲特異DNA,具有特異性強、敏感性高的特點。在PCR中使用相應的引物,可擴增出隱孢子蟲DNA特異的452bp片段,其敏感性可達0.1pg水平。[4]

免疫學診斷

隱孢子蟲病的免疫學診斷近年發展較快,具有彌補糞檢不足的優點。

  1. 糞便標本的免疫診斷:均需採用與卵囊具高親和力的單克隆抗體。在IFAT的檢測中卵囊在熒光顯微鏡下呈明亮黃綠色熒光,特異性高、敏感性好。適用於對輕度感染者的診斷和流行病學調查。採用ELISA技術檢測糞便中的卵囊抗原,敏感性、特異性均好,勿需顯微鏡。流式細胞計數法可用於卵囊計數,考核療效。
  2. 血清標本的免疫診斷:常採用IFAT、ELISA和酶聯免疫印跡試驗(ELIB),特異性、敏感性均較高,可用於隱孢子蟲病的輔助診斷和流行病學調查。

流行分布

隱孢子蟲病呈世界性分布。迄今已有74個國家,至少300個地區有報道。各地感染率高低不一,一般發達國家或地區感染率低於發展中國家或地區。在腹瀉患者中,歐洲、北美洲隱孢子蟲檢出率為0.6%~20%,亞洲、大洋州、非洲和中南美洲為3%~32%。很多報道認為,隱孢子蟲的發病率與當地的空腸彎曲菌、沙門氏菌、志賀氏菌、致病性大腸桿菌和藍氏賈第鞭毛蟲相近,在寄生蟲性腹瀉中占首位。同性戀並發艾滋病患者近半數感染隱孢子蟲。在與病人、病牛接觸的人群和在幼兒集中的單位,隱孢子蟲腹瀉暴發流行時有發生。

國內韓范於1987年在南京首先發現了人體隱孢子蟲病病例。隨後安徽內蒙福建等19個省區也相繼報道了一些病例,截止到1998年,據不完全統計已超過千例。在腹瀉患者中的檢出率為0.9%~13.3%。

隱孢子蟲病流行具備下列特點:2歲以下的嬰幼兒發病率較高,男女間無明顯差異;溫暖潮濕季節發病率較高;農村多於城市,沿海港口多於內地;經濟落後、衛生狀況差的地區多於發達地區;畜牧地區多於非牧區;旅遊者多於非旅遊者。

流行環節

  1. 傳染源 :感染了隱孢子蟲的人和動物都是傳染源,已知40多種動物,包括哺乳類動物,如牛、羊、犬、貓等均可作為該蟲的保蟲宿主。隱孢子蟲病人和帶蟲者的糞便和嘔吐物中均含有卵囊,都是重要的傳染源。
  2. 傳播途徑:本病為人畜共患性疾病,人與動物可以相互傳播,但人際的相互接觸是人體隱孢子蟲病最重要的傳播途徑。傳播可發生於直接或間接與糞接觸,食用含隱孢子蟲卵囊污染的食物或水是主要傳播方式。

近年來,英、美等國均有水源污染引起暴發流行的報道,如只有6萬人口的佐治亞洲,有13,000人發生了胃腸炎,其中39%糞檢卵囊陽性。旅遊者亦常通過飲用污染的水源而造成暴發流行。此外,同性戀者之間的肛交也可導致本蟲傳播,痰中有卵囊者可通過飛沫傳播。

易感人群

人對隱孢子蟲普遍易感。嬰幼兒、艾滋病患者、接受免疫抑制劑治療的病人以及免疫功能低下者更易感染。在歐美、大約11%~21%的艾滋病患者腹瀉便中發現該蟲卵囊,而在非洲等發展中國家可達12%~48%。

本段防治

應防止病人、病畜及帶蟲者的糞便污染食物和飲水,注意糞便管理和個人衛生,保護免疫功能缺陷或低下的人,增強其免疫力,避免與病人病畜接觸。凡接觸病人病畜者,應及時洗手消毒;因卵囊的抵抗力強,病人用過的便盆等必須在3%漂白粉中浸泡30分鐘後,才能予以清洗。10%福爾馬林、5%氨水可滅活卵囊。 此外, 65~70℃加熱30分鐘可滅活卵囊,因此應提倡喝燒開過的水。

隱孢子蟲病至今尚無特效治療藥。一般認為對免疫功能正常患者,應用對症和支持療法,糾正水、電解質紊亂可取得良好的效果。對免疫功能受損者,恢復其免疫功能、及時停用免疫抑制劑藥物則是主要措施,否則治療大多無效。國外目前有用螺旋黴素巴龍黴素治療者。用人工高免疫牛初乳(hyperimmune bovine colostrum, HBC)、牛乳球蛋白、牛轉移因子治療也獲得療效。國內用大蒜素治療,有一定效果。

環境標準

生活飲用水衛生標準GB5749-2006 表3 水質非常規指標與限值 隱孢子蟲(個/10L)<1

視頻

孢子蟲病(1) 判斷與治療

視頻

隱孢子蟲(1)

參考文獻