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粗多糖是指複合型雜多糖,主要有黏多糖、脂多糖、結合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。隨着科技的發展,粗多糖的保健功能越來越引起人們的重視。一般是從大豆籽粒中提取出的可溶性寡糖的總稱,大豆中的寡糖屬於а-半乳糖苷類,包括棉籽糖、水蘇糖和Vabascose。[1]
功效和作用
粗多糖是指複合型雜多糖,主要有黏多糖、脂多糖、結合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。隨着科技的發展,粗多糖的保健功能越來越引起人們的重視。
粗多糖的降血糖和防治糖尿病作用
糖尿病是一組以高血糖為特徵的綜合症。研究表明,粗多糖有顯著的降血糖作用,用於糖尿病的輔助治療,所有患者症狀均有明顯好轉。其降血糖機制主要有提高肝臟抗氧化能力,增強肝葡萄糖激酶活性。因此,粗多糖可用於保健食品及糖尿病的輔助治療。
粗多糖的降血脂作用
大量研究表明,粗多糖能降低血漿總膽固醇,對抗實驗性高膽固醇血症的形成,使高脂血症的血漿總膽固醇、甘油三酯、LDL(低密度脂蛋白膽固醇)及中性脂下降,HDL(高密度脂蛋白膽固醇)上升。而HDL被認為是對機體有益的,因為它能增強膽固醇通過肝臟的排泄。粗多糖還能與脂蛋白酯酶結合,促進動脈壁脂蛋白酯酶入血而粗多糖抗血凝、抗血栓作用
血栓形成主要包括三個階段:
(1)血小板粘附和聚集;
(2)血液凝固;
(3)纖維蛋白溶解。
研究表明,粗多糖能明顯抑制血小板的粘附作用,並降低血液粘度,直接影響血栓形成的第一階段;粗多糖在體內、體外均有顯著的抗凝作用,並減少血小板數,延長血凝從而也影響到血栓的形成;另外,粗多糖能提高纖維蛋白溶解的活力,起到溶解血栓的作用。由此可見,粗多糖能作用於血栓形成的所有環節。
粗多糖的增強機體免疫功能
粗多糖能夠促進單核巨噬細胞系統吞噬功能,增強機體自我保護的能力,有效的增強了機體體液免疫作用。大量藥理和臨床研究已發現,天然粗多糖對機體免疫功能的影響方式和途徑主要有3種:(激活巨噬細胞1);(2)激活網狀內皮系統,生物體內的網狀內皮系統具有吞噬、排除老化細胞和異體及病原體的作用;(3)激活T和B的淋巴細胞。
粗多糖簡介
粗多糖是指複合型雜多糖,主要有黏多糖、脂多糖、結合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。隨着科技的發展,粗多糖的保健功能越來越引起人們的重視。
(1)促進雙歧桿菌的增殖:人體雖然不能直接利用粗多糖,但是粗多糖可被腸內細菌利用,並且能促進雙歧桿菌的增殖。雙歧桿菌是一種厭氧革蘭氏陽性細菌,是維護和保持腸道菌群平衡的一個極為重要的因素,也是判斷腸內外環境是否正常的一個可靠依據。
(2)抑制病原菌:大豆粗多糖能促進雙歧桿菌的增殖,從而抑制有害細菌如產生莢膜梭狀芽孢桿菌的生長。雙歧桿菌能發酵粗多糖產生短鏈脂肪酸和一些抗菌素物質,從而可抑制外源致病菌和腸內固有腐敗細菌的生長繁殖。
(3)防止便秘、腹脹,促進消化,調節胃腸功能:腸道內的雙歧桿菌發酵粗多糖產生大量的短鏈脂肪酸(主要是醋酸和乳酸),能刺激腸道蠕動,從而促進消化,防止便秘的產生。
(4)增強免疫功能:如果人較長期的食用無細菌食物,腸道就會因為缺少刺激而使其產生抗體的能力下降,從而容易誘發疾病。食用粗多糖,促進雙歧桿菌的增殖,將對腸道免疫細胞產生刺激,提高其產生抗體的能力從而起到防治疾病的效果。
粗多糖的檢測
測定方法 1. 原理
分子量大於10,000道爾頓的多糖經80%乙醇沉澱後,加入鹼性銅試劑,選擇性地從其他高分子物質中沉澱出葡聚糖,沉澱部分與苯酚-H2SO4反應,生成有色物質,在485nm條件下,有色物質的吸光度值與葡聚糖濃度成正比。
2. 適用範圍
參照AOAC方法。適用於檢測含有分子量大於10,000道爾頓葡聚糖的樣品。
3.儀器
(1)分光光度計
(2)離心機
(3) 旋轉混勻器
(4)恆溫水浴鍋
4.試劑
除特殊說明外,實驗用水為蒸餾水,試劑為分析純。
(1) 80%乙醇:800ml無水乙醇加水200ml。
(2) 2.5 mol/L NaOH溶液:100 g NaOH加蒸餾水稀釋至1 L,加入固體無水硫酸鈉至飽和。
(3) 銅貯存液:稱取3.0 g CuSO4 ·5H2O,30.0 g檸檬酸鈉加水溶解至1 L。溶液可貯存2周。
(4) 銅應用溶液:取銅貯存液50 ml,加水50 ml混勻後加入無水硫酸鈉12.5 g,臨用新配。
(5)洗滌液:取水50 ml,加入10 ml銅應用溶液,10 ml 2.5 mol/L NaOH溶液,混勻。
(6) 1.8 mol/L H2SO4:取100ml濃硫酸用水稀釋至1L。
(7) 20 g/L苯酚溶液:稱取2.0g苯酚,加水溶解並稀釋至100ml,混勻備用。
(8)葡聚糖標準液:稱取500mg葡聚糖(分子量500,000D)於稱量皿中,105℃乾燥4h至恆重,置於裝有乾燥硅膠的乾燥器中冷卻。準確稱取100mg乾燥後的葡聚糖,用水定容至100ml,葡聚糖標準濃度為1.0mg/ml。
(9) 葡聚糖標準應用液:吸取葡聚糖標準液10ml,用水稀釋10倍,葡聚糖終濃度為0.1mg/ml。
5. 操作方法
5.1樣品處理
(1) 樣品提取:稱取樣品1~5g,加水100ml,沸水浴加熱2h,冷卻至室溫,定容至200ml(V1),混勻後過濾,棄初濾液,收集餘下濾液。
(2) 沉澱高分子物質:準確吸取上述濾液100ml(V2),置於燒杯中,加熱濃縮至10ml,冷卻後,加入無水乙醇40ml,將溶液轉至離心管中以3000rpm離心5min,棄上清液,殘渣用80%乙醇洗滌3次,殘渣供沉澱葡聚糖之用。
(3)沉澱葡聚糖:上述殘渣用水溶解,並定容至50ml (V3),混勻後過濾,棄初始濾液後,取濾液2.0ml(V4),加入2.5mol/L NaOH2.0ml,Cu應用溶液2.0ml,沸水浴中煮沸2mim,冷卻後以3000rpm離心5min,棄上清液,殘渣用洗滌液洗滌3次,殘渣供測定葡聚糖之用。
(4) 測定葡聚糖:上述殘渣用2.0mL 1.8mol/LH2SO4溶解,用水定容至100mL(V5)。準確吸取2.0ml(V6),置於25ml比色管中,加入1.0ml苯酚溶液,10ml濃硫酸,沸水浴煮沸2分鐘,冷卻比色。從標準曲線上查得相應含量,計算粗多糖含量。
5.2 標準曲線製備:
精密吸取葡聚糖標準應用液0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.50,2.00ml(分別相當於葡聚糖0.01,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.15,0.20mg),補充水至2.0mL,加入苯酚溶液1.0ml,濃硫酸10ml,混勻,沸水浴2分鐘,混勻,沸水浴2分鐘,冷卻後用分光光度計在485nm波長處以試劑空白溶液為參比,測定吸光度值(A),以葡聚糖濃度為橫坐標,A為縱坐標繪製標準曲線。
6.計算
從標準曲線上查得樣品相應含量,計算粗多糖含量。
7.注意事項
(1)苯酚-H2SO4溶液可以和多種糖類進行顯色反應,常用於總糖的測定。所以測定過程中應注意容器及試劑中其他糖類的干擾。
(2)苯酚-H2SO4溶液和不同類的糖反應,顯色的強度略有不同,反映在標準曲線的斜率不同。如果已知樣品中糖的結構,應儘量以同類糖的純品做標準品,或以含有已知濃度的同類產品做對照品進行檢測分析;如果樣品中糖的類型未知或結構多樣,則只能以葡萄糖計或其他糖計報告結果。
(3) 試驗證明葡萄糖、果糖等單糖,蔗糖、乳糖等雙糖、低聚糖--棉子糖,澱粉、糊精等多糖及甜味劑糖精不干擾粗多糖測定。
(4) 本方法由北京市衛生防疫站建立,經中國預防醫學科學院營養與食品衛生研究所驗證。
粗多糖的提取 提取植物多糖主要根據其不同的溶解度來選擇不同的溶劑進行提取。提取多糖最常用的溶劑有水、稀酸、稀鹼以及二甲亞碸等。其中二甲亞碸雖然是一種提取多糖的良好溶劑,但價格昂貴,對人體有害,在使用上受到限制。用稀酸稀鹼提取多糖時,雖然多糖總量比水提取的得率高,但得到的多糖含量低,而且酸鹼提取會引起多糖降解,影響其生物活性。用水提取多糖,成本低,不破壞生物活性,方便實用且安全性高。因此,先用體積分數80%的乙醇處理原料以除去單糖、低聚糖、苷類、生物鹼及蛋白等物質,再用傳統的水提工藝浸提多糖,通過單因素試驗和正交試驗確定較優的鮮山藥多糖水提醇沉工藝條件,並對精製的山藥多糖進行初步鑑定,又用改良的苯酚-硫酸法測定了多糖含量。