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胰蛋白酶
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胰蛋白酶
中文名稱：胰蛋白酶別稱：胰酶水溶性：易溶作用：消化酶、活化作用

胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 為蛋白酶的一種，EC 3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中，作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成後，作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切斷。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。是特異性最強的蛋白酶，在決定蛋白質的氨基酸排列中，它成為不可缺少的工具。^[1]

物化性質

胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，純化獲得的結晶，再製成的凍干製劑。易溶於水，不溶於三氯甲烷、乙醇、乙醚等有機溶劑。在pH1.8時，短時間煮沸幾乎不失活;在鹼溶液中加熱則變性沉澱，Ca2+有保護和激活作用，胰蛋白酶的等電點為pH10.1。牛胰蛋白酶原有229個氨基酸組成，含6對二硫鍵，其氨基酸排列順序和晶體結構已被闡明。在腸激酶活自身催化下，酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解，釋放出來纈-天-天-天-天-賴6肽，生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個，分子量23800 ，活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。豬胰蛋白酶的化學結構與牛胰蛋白酶十分相似，在氨基酸殘基排列順序中，只有41個氨基酸殘基不同，但分子構型有很大區別。沉降係數S20W為2.77S，pI=10.8，熱穩定性較牛胰蛋白酶穩定，Ca2+對酶的保護作用不及牛羊的明顯，無螯合Ca2+的中心部位。有6對二硫鍵，斷裂1~2個鍵，均不至於破壞酶分子的完整結構而保護了酶的活性。酶的活力分別相當於牛的72%及羊的61%。羊胰蛋白酶與牛、豬的相似，但其活力略高於牛和豬的。胰蛋白酶專一作用有鹼性氨基酸精氨酸及賴氨酸羧基所組成的肽鍵。酶本身很容易自溶，由原先的β-胰蛋白酶酶轉化為α-胰蛋白酶，再進一步降解為擬胰蛋白酶，乃至碎片，活力也逐步下降而喪失。除存在於脊椎動物外，還存在於蠶、海盤車、蝲姑、放線菌等範圍廣泛的生物體中。另外與高等動物的血液凝固和炎症等有關的凝血酶、纖溶酶、舒血管素等蛋白酶在化學結構和特異性等方面與胰蛋白酶具有密切的關係，可以認為這些酶是從共同的祖先酶在進化過程中分化而來的。胰糜蛋白酶與彈性蛋白酶在結構和催化機制方面也具有密切關係，但其特異性則完全不同。胰蛋白酶系自牛、羊或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。中國藥品標準規定按乾燥品計算，每1mg 的效價不得少於2500單位。由牛、羊、豬胰臟提取而得的一種肽鏈內切酶，只斷裂賴氨酸或精氨酸的羧基參與形成的肽鍵。白色或米黃色結晶性粉末。溶於水，不溶於乙醇、甘油、氯仿和乙醚。分子量24 000，pI 10.5，最適pH值7.8~8.5左右。pH>9.0不可逆失活。Ca2+對酶活性有穩定作用;重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對其活性有強烈抑制。臨床用於抗炎消腫，工業上用於皮革製造、生絲處理、食品加工等。

生物藥品說明

藥理作用

胰蛋白酶為肽鏈內切酶，對精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用，可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。由於血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會消化正常組織，而能分解黏痰、膿性痰等黏性分泌物，能促進抗生素、化療藥物向病灶滲透。

適應證
1.用於膿胸、血胸、外科炎症、潰瘍、創傷性損傷、婁管等所產生的局部水腫、血腫、膿腫。
2.用於呼吸道疾患溶解黏痰和膿性痰。
3.用於治療毒蛇咬傷，曾試用於竹葉青、銀環蛇、眼鏡蛇、蝮蛇等毒蛇咬傷的各型病人800餘例，均獲治癒。

禁忌證

1.肝腎出血、出血傾向及結核性膿腫患者禁用。
2.不可用於急性炎症及出血空腔中。

用法用量

1.每次2.5~5mg，用蒸餾水5~10ml溶解。
2.一般應用:1次5000單位，每日1次肌注，用量酌情而定。為防止疼痛，可加適量普魯卡因。局部用藥視情而定，可配成溶液製劑(PH7.4~8.2，微鹼性時活性最強)、噴霧劑、粉劑、油膏等，用作體腔內注射、患部注射、噴霧、濕敷、塗搽等。
3.治蛇毒:取注射用結晶胰蛋白酶2000單位1~3支，加0.25%~0.5%鹽酸普魯卡因(或注射用水)4~20ml稀釋，以牙痕為中心，在傷口周圍作浸潤注射，或在腫脹部位上方作環狀封閉1~2次。如病情需要可重複使用。若傷肢腫脹明顯，可於注射本品30分鐘後，切開傷口排毒減壓(嚴重出血者例外)，也可在腫脹部位針刺排毒。如傷口已壞死、潰爛，可用其0.1%溶液濕敷患處。

注意事項

1.不可作靜注。用前需作劃痕試驗，應注意可能產生過敏反應。
2.吸取注射液後應另換針頭，以免注射時疼痛。
3.外用時，可採用注射用製劑以緩衝液溶解，但必須在3小時內用畢。

不良反應

1.注射局部疼痛、硬結。
2.本品可引起組胺釋放，產生全身反應，有寒戰、發熱、頭痛、頭暈、胸痛、腹痛、皮疹、血管神經性水腫、呼吸困難、眼壓升高、白細胞減少等。症狀輕時不影響繼續治療，給予抗組胺藥和對症藥物即可控制，嚴重時應即停藥。
3.本品偶可致過敏性休克。

專家點評

胰蛋白酶能使痰、血凝塊溶化變稀，易於引流排痰，加速創面癒合淨化，促進肉芽組織增生，而不損傷正常組織，臨床上有消炎消腫功能。

細胞培養

胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關，在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時，胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白質可降低胰酶的活性，所以配製胰酶溶液時應選用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ，如: D-Hanks 液。終止消化時，可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。

1

. 稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為 0.25 %，用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。攪拌混勻，置於 4℃ 內過夜。
2. 用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超淨台內用注射濾器( 0.22 微米微孔濾膜)抽濾除菌。
3. 分裝成小瓶於 -20℃ 保存以備使用可!^[2]