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負鼠科（Didelphidae）是後獸下綱有袋上目中的最大也是分布最廣泛的一科，包括美洲有袋總目負鼠目的絕大多數種類，共約有67種，其分布幾乎遍及拉丁美洲各地，其中一種即北美負鼠（北美）Didelphis virginiana進入了北美洲，最北達到了加拿大南部，是現存分布最北的有袋類。

負鼠科雖然屬於有袋動物，但是只有3個屬的成員有清晰的育兒袋，其它種類則無袋囊或只有簡單的皮褶，較為原始。負鼠的習性比較多樣，有些種類為地棲，有些種類為樹棲，還有一種即水負鼠（水）Chironectes minima為半水棲性，大型的種類大小似貓，小型種類大小似鼠，其中多數種類特別是樹棲的類型有可以纏繞的尾巴。

負鼠多為雜食性，但也有隻食肉和食蟲的種類。負鼠壽命短，繁殖率高，是拉丁美洲森林種數量最多的哺乳動物之一，但多夜間活動且善於隱蔽而不易見到。

負鼠科動物能適應多種環境，大多營樹棲或地棲生活，只有水負鼠營半水棲生活。夜行性。多雜食，但也有隻食蟲的和食肉的種婁。繁殖率很高，懷孕期僅10餘天，幼仔出生時比蜜蜂還小，前肢十分發達，並具銳爪(到達袋囊後脫落)。幼仔在袋中發育60～70天後即可自由出^袋囊，再過1個月左右離開母體獨立生活。

負鼠類的自衛方法是裝死。壽命很少超過兩年，是食肉動物和人婁獵取的對象。由於繁殖率高，食性廣，適應能力強，負鼠類數量和分布依然在增加和擴展。

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