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動物病毒樣顆粒技術

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動物病毒樣顆粒技術》,郭慧琛,孫世琪 著,出版社: 科學出版社。

內容簡介

《動物病毒樣顆粒技術》將納米技術[1]概念引入動物疫苗研究領域在國內尚屬首次,共包括14章,詳細介紹了病毒樣顆粒的基本特徵及其在基礎研究、藥物呈遞、疫苗工程等方面的應用價值,系統描述了應用杆狀病毒-昆蟲細胞表達系統、酵母表達系統、活病毒載體表達系統、哺乳動物細胞表達系統、植物表達系統、原核表達系統、無細胞蛋白質合成表達系統等製備病毒樣顆粒的策略、步驟或程序,同時還介紹了目的蛋白純化鑑定的基本方法及產業化生產病毒樣顆粒應注意的問題和解決思路。

目錄

第一章緒論1

第一節病毒樣顆粒的概念及特點1

一、病毒樣顆粒的概念1

二、病毒樣顆粒的特點及優勢1

三、病毒樣顆粒的不足2

第二節病毒樣顆粒的分類3

第三節病毒樣顆粒的發展歷程3

一、病毒樣顆粒技術的進展3

二、病毒樣顆粒相關表達系統的發展4

三、病毒樣顆粒組裝技術的發展5

參考文獻6

第二章杆狀病毒-昆蟲細胞[2]表達系統9

第一節概述9

一、杆狀病毒-昆蟲細胞表達系統的優點9

二、杆狀病毒載體9

三、宿主11

四、外源基因的表達13

第二節杆狀病毒-昆蟲細胞表達技術13

一、杆狀病毒-昆蟲細胞表達系統的發展13

二、高效表達策略15

第三節Bac-to-Bac杆狀病毒表達系統的VLP製備17

一、載體的選擇17

二、目的基因的克隆21

三、培養昆蟲細胞21

四、重組bacmid的構建21

五、使用PCR分析重組質粒22

六、VLP的製備23

第四節杆狀病毒-昆蟲細胞表達系統在VLP研究中的進展24

一、無囊膜病毒26

二、囊膜病毒28

三、瓶頸和問題30

四、展望34

五、附錄34

參考文獻41

第三章酵母表達系統44

第一節概述44

一、酵母表達系統簡介44

二、常用酵母表達系統分類47

第二節酵母表達技術55

一、酵母表達技術概述55

二、酵母表達技術的高效表達策略56

第三節酵母表達系統在VLP研究中的進展61

一、概述61

二、酵母表達系統在人源病毒VLP中的研究62

三、酵母表達系統在動物病毒VLP中的研究65

第四節展望68

參考文獻69

第四章活病毒載體表達系統74

第一節痘病毒表達系統74

一、痘病毒的分類74

二、痘病毒基因組特點74

三、痘病毒表達載體及其應用75

第二節腺病毒表達系統80

一、腺病毒生物學特點80

二、腺病毒的分類81

三、腺病毒感染及免疫應答機制83

四、重組腺病毒的構建85

五、腺病毒表達系統在VLP研究中的進展85

第三節腺相關病毒表達系統86

一、腺相關病毒病原學特點87

二、腺相關病毒衣殼組裝87

三、腺相關病毒誘導的免疫應答88

四、重組腺相關病毒製備89

五、腺相關病毒遞送系統的應用92

六、腺相關病毒遞送系統發展展望94

第四節慢病毒表達系統94

一、慢病毒表達系統概述95

二、重組慢病毒製備與生產97

三、慢病毒表達系統的應用101

四、慢病毒載體系統發展展望103

五、附錄103

參考文獻105

第五章哺乳動物細胞表達系統108

第一節CHO細胞表達系統108

一、CHO細胞表達載體特徵111

二、宿主細胞的優化113

三、真核表達載體轉染技術113

四、哺乳動物細胞培養條件115

五、CHO製備VLP研究的進展116

第二節HEK293細胞表達系統119

一、HEK293細胞系發展歷史119

二、HEK293細胞表達載體特徵121

三、HEK293生產蛋白質製劑的優點122

四、HEK293真核表達載體的轉染123

五、HEK293細胞製備VLP的研究進展123

第三節細胞培養工藝研究129

一、細胞培養環境的控制129

二、生物反應器130

三、動物細胞流加培養工藝131

四、流加培養的細胞代謝及其基因調控132

第四節穩定表達重組蛋白的哺乳動物細胞系133

一、利用綠色熒光蛋白(GFP)構建穩定表達細胞系134

二、利用慢病毒轉導構建穩定表達細胞系135

三、利用噬菌體φC31整合酶構建穩定表達細胞系135

四、利用轉座子構建穩定表達細胞系136

五、問題136

第五節展望136

參考文獻137

第六章植物表達系統140

第一節植物表達系統概述140

一、植物表達系統的組成140

二、植物表達系統種類142

第二節植物表達系統表達技術143

一、植物表達系統常用載體及工程菌株143

二、提高目的蛋白表達水平的手段146

三、植物表達系統表達重組蛋白純化工藝149

第三節植物表達系統在VLP中的研究進展151

一、囊膜病毒153

二、無囊膜病毒159

第四節展望162

參考文獻163

第七章原核表達系統166

第一節大腸桿菌表達系統概述及技術166

一、大腸桿菌表達系統的組成166

二、大腸桿菌表達系統高效表達的策略169

三、VLP在大腸桿菌表達系統中的表達與組裝173

第二節其他原核表達系統(乳酸菌、鏈黴菌)概述及技術174

一、乳酸菌175

二、鏈黴菌179

第三節原核表達系統在VLP中的研究進展181

一、囊膜病毒181

二、無囊膜病毒184

第四節展望189

參考文獻190

第八章無細胞蛋白質合成系統195

第一節無細胞蛋白質合成系統發展史195

第二節無細胞蛋白質合成系統的優點和不足197

一、CFPS的優點197

二、CFPS存在的問題197

第三節無細胞蛋白質合成系統分類及研究進展198

一、細胞提取物來源CFPS199

二、「PURE」系統CFPS203

三、CFPS的生產方式204

第四節CFPS的主要應用領域205

一、特殊蛋白質的合成205

二、蛋白質高通量表達和篩選206

三、合成藥物207

第五節CFPS在VLP製備中的研究進展207

一、無囊膜病毒207

二、囊膜病毒209

第六節展望212

參考文獻212

第九章病毒樣顆粒的表徵技術215

第一節概述215

第二節生物化學分析技術216

一、MS技術216

二、SDS-PAGE技術218

三、RP-HPLC技術219

第三節生物物理學分析技術220

一、TEM220

二、Cryo-EM221

三、AFM222

四、DLS技術224

五、圓盤離心技術225

六、ES-DMA技術226

七、AF4技術227

八、Native-PAGE技術229

九、密度梯度離心技術229

十、AUC技術232

第四節免疫生物學分析技術234

一、ELISA技術234

二、SPR技術235

參考文獻237

第十章動物病毒樣顆粒疫苗241

第一節VLP疫苗概述241

一、VLP疫苗的優勢241

二、VLP疫苗的多樣性242

三、VLP疫苗的應用246

四、VLP疫苗的分類249

五、展望251

第二節VLP的免疫機制251

一、抗原呈遞細胞的種類、功能251

二、抗原呈遞細胞在VLP疫苗免疫中的作用254

三、B細胞及VLP誘導的B細胞免疫應答255

四、主要組織相容性複合體257

五、抗原呈遞途徑258

六、T細胞及VLP誘導的T細胞免疫應答259

第三節VLP疫苗的研究261

一、人類與人畜共患病VLP疫苗262

二、豬的VLP疫苗274

三、反芻動物的VLP疫苗279

四、禽類的VLP疫苗282

五、兔、魚、犬、貂和貓的VLP疫苗287

參考文獻292

第十一章病毒及病毒樣顆粒作為納米藥物遞送載體305

第一節納米藥物遞送系統概述305

一、納米藥物遞送系統305

二、常見納米藥物遞送載體的分類及特性311

三、病毒及病毒樣顆粒類納米藥物遞送載體314

第二節病毒及病毒樣顆粒承載藥物的機制和原理316

一、從材料學與化學的角度看VNP/VLP316

二、VNP/VLP的解離-自組裝特性317

三、物理吸附法317

四、化學修飾法318

第三節病毒及病毒樣顆粒作為納米藥物遞送載體的研究進展322

一、植物VNP/VLP作為納米藥物遞送載體322

二、人/動物VNP/VLP作為納米藥物遞送載體334

三、噬菌體VNP/VLP作為納米藥物遞送載體340

四、展望345

參考文獻345

第十二章病毒樣顆粒作為核酸的遞送載體348

第一節核酸類藥物簡介348

一、核酸類藥物與基因治療348

二、核酸類藥物的現狀和前景349

三、核酸類藥物遞送載體研究現狀350

四、病毒樣顆粒作為核酸類藥物遞送載體352

第二節病毒樣顆粒遞送核酸的機理和方法353

一、病毒樣顆粒遞送核酸的機理353

二、病毒樣顆粒遞送核酸的方法356

第三節病毒樣顆粒遞送DNA的研究進展357

一、病毒樣顆粒遞送DNA的研究358

二、病毒樣顆粒遞送DNA在人類病毒中的應用360

第四節病毒樣顆粒遞送RNA的研究進展365

一、病毒樣顆粒遞送RNA在人和動物中的應用365

二、病毒樣顆粒遞送RNA在植物中的應用367

三、病毒樣顆粒遞送基因短片段的研究367

第五節展望與不足371

參考文獻372

第十三章病毒及病毒樣顆粒作為新型功能納米元/器件375

第一節病毒及病毒樣顆粒與量子點375

一、量子點概述375

二、病毒及病毒樣顆粒-量子點複合物378

三、病毒及病毒樣顆粒-量子點複合物的研究進展379

第二節病毒及病毒樣顆粒與金納米顆粒385

一、金納米顆粒概述385

二、病毒及病毒樣顆粒-金納米顆粒複合物的研究進展385

第三節病毒及病毒樣顆粒在磁共振成像中的應用394

一、磁共振成像概述394

二、VNP/VLP與T1造影劑397

三、VNP/VLP與T2造影劑400

第四節病毒樣顆粒與多模態成像404

一、多模態成像概述404

二、VNP/VLP在多模態成像中的應用406

三、展望410

參考文獻410

第十四章病毒樣顆粒在基礎研究中的應用413

第一節病毒樣顆粒的結構解析413

一、戊型肝炎病毒樣顆粒的結構413

二、尼帕病毒樣顆粒的結構415

三、β-諾達病毒樣顆粒的結構416

四、豬圓環病毒樣顆粒的結構418

五、柯薩奇B3病毒樣顆粒的結構419

六、展望420

第二節病毒樣顆粒的組裝機制研究421

一、靜電作用力421

二、滲透壓422

三、核酸片段423

四、溫度和pH425

五、熱休克蛋白426

六、穀胱甘肽426

七、展望427

第三節病毒樣顆粒模擬病毒的研究427

一、病毒樣顆粒模擬病毒的生命周期428

二、病毒樣顆粒模擬病毒的組織嗜性429

三、病毒樣顆粒模擬病毒活化免疫應答430

四、展望433

參考文獻433

參考文獻