求真百科歡迎當事人提供第一手真實資料,洗刷冤屈,終結網路霸凌。

變更

前往: 導覽搜尋

黄曲霉

移除 4,727 位元組, 4 年前
無編輯摘要
}}
'''黄曲霉''',半知菌类,一种常见腐生 [[ 真菌 ]] 。多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。菌落生长较快,结构疏松,表面灰绿色,背面无色或略呈褐色。菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝具有分隔;气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端产生烧瓶形或近球形顶囊,表面产生许多小梗(一般为双层),小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子合成孢子头,可用于产生 [[ 淀粉 ]] 酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等,也是酿造工业中的常见菌种。
1993年,黄曲霉毒素就被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质,1毫克就是致癌剂量。<ref>[https://www.sohu.com/a/327492937_676706 注意!这种物质吃1毫克就是致癌剂量!高温杀不死,很多食物里都有!],搜狐网,2019-07-17</ref>
1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素b1最为多见。其毒性和致癌性也最强。
上世纪60年代,在 [[ 英国 ]] 发生的十万只火鸡突发性死亡事件被确认与从 [[ 巴西 ]] 进口的花生粕有关。进一步的调研证明,这些 [[ 花生 ]] 粕被一种来自 [[ 真菌 ]] 的有毒物质污染,这些研究工作最终使人们发现了黄曲霉(aspergillus.flavus)产生的有毒代谢物质,黄曲霉毒素(aflatoxins)是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物,特曲霉也能产生黄曲霉毒素,但产量较少。产生的黄曲霉毒素主要有b1,b2,g1,g2以及另外两种代谢产物m1,m2。其中m1和m2是从牛奶中分离出来的。b1,b2,g1,g2,m1和m2的在分子结构上十分接近。
黄曲霉的有些菌系能产生黄曲霉毒素,不仅能引起禽畜中毒致死,亦有致癌作用。
==化学结构==
[[ File:T01b5ca91203501ed77.png|缩略图|250px|[https://image.so.com/view?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89%E6%AF%92%E7%B4%A0%E7%BB%93%E6%9E%84&src=srp&correct=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89%E6%AF%92%E7%B4%A0%E7%BB%93%E6%9E%84%E5%BC%8F&ancestor=list&cmsid=ba2db587d2afddd3d8792e6aad8411e3&cmras=6&cn=0&gn=0&kn=0&crn=0&bxn=0&fsn=60&adstar=0&clw=249#id=f61b59923b33c7517462d3470bcf7ee8&currsn=0&ps=58&pc=58 原圖鏈接][https://www.chemsrc.com/SupplierProduct/6795-23-9_404314.html 来自化源网]]]
黄曲霉毒素(aflatoxins),是一组化学结构类似的化合物,已分离鉴定出12种,包括b1,b2,g1,g2,m1,m2,p1,q,h1,gm,b2a和毒醇.黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素,b1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物.即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素).前者为基本毒性结构,后者与致癌有关.m1是黄曲霉毒素b1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物.黄曲霉毒素的主要 [[ 分子 ]] 型式含 b1,b2,g1,g2,m1,m2等.其中m1和m2 主要存在于牛奶中.b1为毒性及致癌性最强的物质.
《黄曲霉毒素b1,b2,g1,g2,m1,m2化学结构式》
==理化特性==
目前已经确定黄曲霉毒素的结构有AFB1、AFB2、AFM1等18种,它们的基本结构中都含有二呋喃环和氧杂萘邻酮(又名香豆素)。黄曲霉毒素很难溶解于水、己烷、 [[ 乙醚 ]] [[ 石油 ]] 醚,易溶于 [[ 甲醇 ]] [[ 乙醇 ]] 、氯仿以及二甲基甲酰胺(DMF)等有机溶剂。黄曲霉的 [[ 分子 ]] 量为312~346,熔点为200~300℃,该毒素耐高温,通常的加热处理方式对其破坏性很小,只有在熔点的温度下才会发生分解。黄曲霉毒素在遇碱情况下能迅速分解,但此反应可以实现逆还原,即在酸性的条件下又会复原。一般来说,温度30℃、相对湿度80%、谷物水份在14%以上(花生的水份在9%以上)的条件最适合黄曲霉繁殖和生长。在24~34℃之间,黄曲霉菌产毒量最高。几乎所有谷物、饲草和各种食品(包括畜产品)都可作为黄曲霉基质。<ref>[http://www.cnfoodsafety.com/2017/0509/23240.html 黄曲霉毒素的危害、限量标准及检测方法],食安中国网,2017-05-09</ref>
==滋生环境==
[[ File:W020180303406886140504.jpg|缩略图|250px|[https://image.so.com/view?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&src=tab_www&correct=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&ancestor=list&cmsid=cf6d5b7101b4fddaba06f99f0e6d0b61&cmras=6&cn=0&gn=0&kn=27&crn=0&bxn=20&fsn=107&adstar=0&clw=249#id=d256a8a995b620888270c245f42622b7&currsn=0&ps=67&pc=67 原圖鏈接][http://wap.kaiwind.com/health/201803/03/t20180303_6221229.shtml 来自凯风网]]]
黄曲霉毒素存在于土壤,动植物,各种坚果,特别是 [[ 花生 ]] [[ 核桃 ]] 中。在玉米,通心粉,调味品牛奶,奶制品,食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般在热带和亚热带地区,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高,在中国,产生黄曲霉毒素的产毒菌种主要为黄曲霉,1980年测定了从17个省粮食中分离的黄曲霉1660株,广西地区的产毒黄曲霉最多,检出率为58%.总的分布情况为:华中,华南,华北产毒株多,产毒量也大,东北,西北地区较少.
1、发霉的花生、玉米
发霉的食物,特别是淀粉含量高的食物,如花生、 [[ 玉米 ]] 等, [[ 淀粉 ]] 在高温和潮湿的环境下会滋生黄曲霉毒素。
2、没洗干净的筷子和砧板
我们平时使用筷子来吃花生、玉米等淀粉含量高的食物时,筷子缝里最容易藏淀粉,一来二去霉变了,黄曲霉毒素就藏在里面了。所以,吃完饭一定要洗干净筷子!  同样道理,木质砧板如果没有及时清洗干净,上面残留的食物残渣和水分就会成为微生物良好的培养基。
3、发苦的坚果
4、劣质芝麻酱、自榨油
有些商家为了降低成本,用糠 [[ 芝麻 ]] 、瘪花生甚至变质的芝麻、花生做芝麻酱、花生酱。变质的花生中含有黄曲霉毒素,而用这种原料加工后的产品,可想而知!
用发霉花生、玉米等榨得的油中,也可能带入黄曲霉毒素。而一些小作坊的压榨机或家用榨油机工艺简单,缺乏除去有害物质的工艺,不能对原材料进行精炼。
黄曲霉素含量在30-50µg/kg为低毒,50-100µg/kg为中毒,100-1000µg/kg为高毒,1000µg/kg以上为极毒。其毒性为氰化钾的10倍,为砒霜的68倍。 黄曲霉素含量在1mg/kg就可诱发癌症。而1mg/kg黄曲霉素含量只相当于1吨粮食中只有1粒芝麻大的黄曲霉素。
黄曲霉素的毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性,其中以B1毒性最大。当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄人,可造成慢性中毒,生长障碍,引起纤维性病变,致使纤维组织增生。黄曲霉素的致癌力也居首位,是目前已知最强致癌物之一,可诱发骨癌、肾癌、直肠癌、 [[ 乳腺癌 ]] 、卵巢癌等。
黄曲霉毒素M1于1993年被世界卫生组织(WHO)癌症研究机构划定为一类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。<ref>[http://discovery.163.com/special/aflatoxin/ 黄曲霉素有多大毒性?],网易网</ref>
==危害==
1、 黄曲霉毒素对动物的危害
黄曲霉毒素的毒性非常高,是目前已发现霉菌中毒性最大的一种。目前发现的18种黄曲霉菌毒素家族中,AFB1的毒性最为强烈,AFM1、AFG1次之,AFB2、AFG2、AFM2毒性较弱。AFB1的毒性是砒霜的68倍,诱发肝癌的能力甚至比二甲基亚硝胺还要大75倍。其毒性大小因动物的种类、年龄、性别、体况及营养状况的不同而有所差异,其中,年幼动物、雄性动物对其反应较敏感。
黄曲霉毒素具有很强的诱导突变、抑制免疫以及强致癌的作用。黄曲霉毒素起作用的靶器官主要是肝脏,动物的中毒症状以全身性出血、消化机能发生障碍及神经系统的紊乱为特征。急性中毒症状主要表现为食欲废绝、运动失调、排泄停止、肝炎、黄疸,还包括肝脏充血、出血、肿大、变性和坏死,并且伴有比较严重的血管和中枢神经损伤,动物中毒后几小时至几天内死亡。动物慢性中毒的早期症状表现为食欲不佳,体重减轻,生产性能降低,后期出现黄疸、脂肪肝、肝损伤等现象,严重时会出现免疫机能丧失和患癌等病症。
2、 黄曲霉毒素对人类健康的危害 黄曲霉毒素被公认为强致肝癌的物质,其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的致癌性最强。长期食用含有低水平黄曲霉毒素食物的人肝脏将受到较大损害。最近,有些第三世界的国家报道了许多会由黄曲霉毒素引起急性中毒的新证据,其综合病症的显著特征为呕吐、腹痛、肺水肿、惊厥、痉挛、昏迷,并且由大脑水肿引起死亡和肝脏、肾形矿脉和心脏的脂肪过多。1988年国际癌症研究中心(IARC)将黄曲霉毒素B1列为人类的强烈致癌物之一,而许多亚洲和非洲的流行病研究者也证实了日粮黄曲霉毒素和肝细胞癌(LCC)有正效应 。另外,人类因为黄曲霉毒素而致癌的几率可能与年龄、性别、营养状况以及肝或者寄生虫感染有关。早在1972年,Shank等人在泰国调查市售的食品和家庭的熟食(膳食),计算每人每日平均摄入的黄曲霉毒素量,就发现了黄曲霉毒素的摄入量与肝癌发病率的地区分布相一致。菲律宾的玉米和自制花生酱黄曲霉毒素污染严重,其中一个以玉米作为主食的地区与另外一个经常食用自制花生酱的地区人民肝癌的发病概率比其他地区高约7倍以上。在食用花生酱的居民之中,曾测定出吃花生酱后的人尿液中含有黄曲霉毒素代谢产M1,在7个每天由食用花生酱而摄入黄曲霉毒素B1 11.2~15.0毫克的儿童的尿中,有3个样品测出M1 。<ref>[http://www.cnfoodsafety.com/2017/0509/23240.html 黄曲霉毒素的危害、限量标准及检测方法],食安中国网,2017-05-09</ref> 
==检验检疫==
[[ File:Ed3bf39b9c9a43b18f9f74055916d1e3 th.png|缩略图|250px|[https://image.so.com/view?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&src=tab_www&correct=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&ancestor=list&cmsid=cf6d5b7101b4fddaba06f99f0e6d0b61&cmras=6&cn=0&gn=0&kn=27&crn=0&bxn=20&fsn=107&adstar=0&clw=249#id=013a8f58072e61a128c519ab57a53bd6&currsn=0&ps=67&pc=67 原圖鏈接][https://www.sohu.com/a/132285614_685270 来自搜狐]]]  
1995年,世界卫生组织制定的食品黄曲霉毒素最高允许浓度为15μg/kg. ● 中国政府对各种食物中黄曲霉毒素的最高允许量见表2. 表2 中国对食品中黄曲霉毒素的最高允许含量
中国对 物 名 称品中黄曲霉毒素的最高允许含量
食 物 名 称     、 最高允许含量/(μg/kg)
玉米,花生,花生油,坚果和干果(核桃,杏仁)——20(黄曲霉毒素b1)
牛乳及其制品(消毒牛奶,新鲜生牛乳,全脂牛奶粉,淡炼乳,甜炼乳,奶油),黄油,新鲜猪组织(肝,肾,血,瘦肉)——0.5(黄曲霉毒素m1)
美国联邦政府有关法律规定人类消费食品和奶牛饲料中的黄曲霉毒含量(指b1+b2+g1+g2的总量)不能超过15μg/kg.人类消费的牛奶中的含量不能超过0.5μg/kg,其他动物饲料中的含量不能300μg/kg.
而欧盟国家规定更加严格,要求人类生活消费品中的黄曲霉毒素b1的含量不能超过0.05μg/kg.
== 检测 方法== [[ File:V2-f6ca06b24e8dd30b904f393d85b44644 qhd.jpg|缩略图|250px|[https://image.so.com/view?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&src=srp&correct=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&ancestor=list&cmsid=ad0cd5bc29047863882c7163a963a83f&cmras=6&cn=0&gn=0&kn=27&crn=0&bxn=20&fsn=107&adstar=0&clw=249#id=24be8ac5dae359274928fab6df711a20&prevsn=0&currsn=107&ps=126&pc=59 原圖鏈接][https://www.zhihu.com/search?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&type= content 来自知乎]]]1、 薄层层析法===
薄层层析(thin-layer chromatography,tlc)是在黄曲霉毒素研究方面应用最广的分离技术.自1990年,它被列为aoac (association of official agricultural chemists)标准方法,该方法同时具有定性和定量分析黄曲霉毒素的功能.
=== 2、 液相色谱法===
液相色谱(liquid chromatography,lc)与薄层层析在许多方面具有相似性,二者互相补充.通常用tlc进行前期的条件设定,选择适宜的分离条件后,再用lc进行黄曲霉毒素的定量测定.
==免疫化学分析方法==
[[ File:V2-f6ca06b24e8dd30b904f393d85b44644 qhd.jpg|缩略图|250px|[https://image.so.com/view?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&src=srp&correct=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&ancestor=list&cmsid=ad0cd5bc29047863882c7163a963a83f&cmras=6&cn=0&gn=0&kn=27&crn=0&bxn=20&fsn=107&adstar=0&clw=249#id=24be8ac5dae359274928fab6df711a20&prevsn=0&currsn=107&ps=126&pc=59 原圖鏈接][https://www.zhihu.com/search?q=%E9%BB%84%E6%9B%B2%E9%9C%89&type=content 来自知乎]]]
利用具有高度专一性的单克隆抗体或多克隆抗体设计的黄曲霉毒素的免疫分析方法,也是最常用的黄曲霉毒素检测方法.这类方法通常包括放射免疫分析方法(radioimmunoassay,ria),酶联免疫法(enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa)和免疫层析法(immunoaflinity column assay,ica).它们均可以对黄曲霉毒素进行定量测定.
 
(1) 免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-hplc法
 
免疫亲和柱法和酶联免疫吸附法虽然都可达到速简便效果,但酶联免疫吸附法仅能检测单一毒素(如黄曲霉毒素b1)含量,而且易出现假阳性结果,难以控制.免疫亲和柱法(包括荧光光度法和hplc法)却能达到既定量准确又快速简便的要求.
 
免疫亲和柱的使用可以避免传统tlc和hplc的缺点,同时免疫亲和柱与tlc和hplc法结合可以大大提高工作效率,提高灵敏度和准确度.
 
黄曲霉毒素免疫亲和柱-荧光光度计法是以单克隆免疫亲和柱为分离手段,用荧光计,紫外灯作为检测工具的快速分析方法.它克服了tlc和hplc法在操作过程中使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物和在样品预处理过程中使用多种有毒,异味的有机溶剂,毒害操作人员和污染环境的缺点.同时黄曲霉毒素免疫亲和柱-荧光光度计法分析速度快,一个样品只需10-15min,比传统方法快几个小时甚至几天时间;仪器设备轻便容易携带,自动化程度高,操作简单,直接读出测试结果,可以在小型实验或现场使用.可以进行黄曲霉毒素总量 (b1b2g1g2) 的测定,检测限可达到1μg/kg,达到黄曲霉毒素标准限量值以下测定范围为1-300μg/kg.
 
黄曲霉毒素免疫亲和柱-高效液相色谱法比传统的hplc法更加安全,可靠,灵敏度和准确度高.它采用单克隆抗体免疫技术,可以特效性地将黄曲霉毒素或其他真菌毒素分离出来,分离效率和回收率高.
 
分析原理试样中的黄曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液经过过滤,稀释后,用免疫亲和柱净化,以甲醇将亲和柱上的黄曲霉毒素淋洗下来,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高测定灵敏度,然后用荧光分光光度计进行定量.也可以将甲醇-黄曲霉毒素淋洗液的一部分注入hplc中,对黄曲霉毒素b1,b2,g1,b2分别进行定量分析.免疫亲和柱是用大剂量的黄曲霉毒素单克隆抗体固化在水不溶性的载体上,然后装柱而成.该方法的测定范围0-300μg/kg.
 
(2) 酶联免疫吸附法:
 
1996年,nakane 建立了辣根过氧化物酶标记抗体的测定技术.由于该方法简便,敏感,特异,可作为多种抗原或抗体的测定,20世纪70年代后期,该方法引入真菌毒素的检测中,下面介绍的是竞争性酶联免疫吸附间接法检测黄曲霉毒素b1.
 
原理:将已知抗原吸附在固态载体表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗体与待测样品(含有抗原)提取液的混合液,竞争培养后,在固相载体表面形成抗原抗体复合物.洗除多余抗体成分,然后加入酶标记的抗球蛋白的第二抗体结合物,与吸附在固体表面的抗原抗体结合物相结合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物发生降解反应,产生有色物质,通过酶标检测仪测出酶底物的降解量,从而推知被测样品中的抗原量.
 
(3) 微柱筛选法 可以用来半定量测定各种食品中黄曲霉毒素b1,b2,g1,g2的总量.
 
原理 样品提取液中的黄曲霉毒素被微柱管风硅镁型吸附层吸附后,在波长365nm紫外光灯下显示蓝紫色荧光环,其荧光强度与黄曲霉毒素在一定的光密度范围内成正比例关系.若硅镁型吸附剂层未出现蓝紫色荧光,则样品为阴性(方法灵敏度为5-10μg/kg).由于在微柱上不能分离黄曲霉毒素b1,b2,g1,g2,所以测得结果为总的黄曲霉毒素含量.
(4) 利用具有高度专 步式 性的单克隆抗体或多克隆抗体设计的黄曲霉毒素的免疫分析方法,也是最常用的 黄曲霉毒素检测 金标试纸 方法.这类方法通常包括放射免疫分析方法(radioimmunoassay,ria),酶联免疫法(enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa)和免疫层析 (immunoaflinity column assay,ica).它们均可以对黄曲霉毒素进行定量测定。
一步式 薄膜层析法和液相色谱法是目前国内绝大多数检测机构都在使用的方法,由于其检测周期长,程序复杂,所需试剂繁多等缺点已远远不能满足现代检测要求.随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学,生物化学,分子生物学的不断发展,人们已创建了不少快速,简便,特异,敏感,低耗且适用的 黄曲霉毒素检测 方法.而且以 金标试纸 为代表的这些方法已经被先进国家所广泛使用,引进和消化这些先进的方 法是 利用单克隆抗体而设计 我们检测领域 固相 当务之急. 免疫 分析 亲和柱法优点很多,但由于检测费用过高,而无 普及. 由此产生的 一步式黄曲霉毒素 快速 检测 金标 试纸 可在5-10分钟完成对样品中黄曲霉毒素的定性测定.借助黄曲霉毒素标准样品,这种方 能估算黄曲霉毒素的含量,非常 似乎更 适用于 现场测试和进行大量样品的初选.中国,值得推广。
== 分析參考來源 =={{Reflist}}
[[Category: 300 薄膜层析法和液相色谱法是目前国内绝大多数检测机构都在使用的方法,由于其检测周期长,程序复杂,所需试剂繁多等缺点已远远不能满足现代检测要求.随着现代 学技术的不断发展,特别是免疫学, 學類]] [[Category:360 生物 化学,分子 科學總論]][[Category:369 微 生物 学的不断发展,人们已创建了不少快速,简便,特异,敏感,低耗且适用的黄曲霉毒素检测方法.而且以金标试纸为代表的这些方法已经被先进国家所广泛使用,引进和消化这些先进的方法是我们检测领域的当务之急.免疫亲和柱法优点很多,但由于检测费用过高,而无法普及.而一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法似乎更适用于中国,值得推广.學]]
10,734
次編輯